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2010 年度 実績報告書

子供の虐待が脳発達に及ぼす影響について、脳の形態からエピジェネティクスを含む検討

研究課題

研究課題/領域番号 21659173
研究機関群馬大学

研究代表者

小湊 慶彦  群馬大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (30205512)

研究分担者 中島 たみ子  群馬大学, 大学院・医学系研究科, 助教 (40008561)
佐野 利恵  群馬大学, 大学院・医学系研究科, 助教 (70455955)
天沼 誠  群馬大学, 医学部, 准教授 (10212565)
キーワードDNAメチル化 / 虐待 / Pyrosequencing
研究概要

研究期間は子どもの虐待死亡事件解剖例はなかったため、症例数を増やすことはできなかったが、虐待死亡例以外の多くの収集された試料につき、解析を行った。試料は0歳から100歳の脳組織であり、解剖時に摘出した脳をホルマリン固定後、前頭葉上前頭回、扁桃体、海馬、小脳からパラフィン包埋切片を作製した。本研究を実行するための準備として、各組織切片の大脳皮質からキットを用いてDNAを抽出し、Bisulfite処理を行った。メチル化解析については、これまでに、行ってきたPP1遺伝子やREELIN遺伝子の上流域に対する塩基配列特異的なプライマーを用いて行ってきた。
ところで、遺伝子は加齢に伴いDNAメチル化を受けることが明らかとなってきた。そのため、虐待死亡例のDNAメチル化が異常なDNAメチル化の増加であるか否かを判断するために、発育や加齢に伴うDNAメチル化の程度を調べる必要性が生じてきた。そこで、新たに年齢に依存してメチル化の程度が変わることが報告されている、06-Methylguanine DNA transferase(MGMT)遺伝子の上流域に対する特異的なプライマーも用いてPCRを行い、これらの領域について検討を行った。
実際のメチル化解析の方法は、Bisulfite genomic sequencing法、COBRA法、メチル化特異的PCR法、メチル化感受性PCR法、Pyrosequencing法等が挙げられるが、これまでの予備実験で一番簡便かつ効率的であると判明しているPyrosequencing法を用いて遺伝子の上流域のメチル化を評価した。この他にも、メチル化解析の対象となる遺伝子は多数あることから、対象となる領域の数を増やしていき、加齢に伴うDNAメチル化の程度を調査し、虐待や恐怖体験において特異的にメチル化される遺伝子領域を同定したい。

  • 研究成果

    (14件)

すべて 2011 2010

すべて 雑誌論文 (8件) (うち査読あり 8件) 学会発表 (6件)

  • [雑誌論文] The 3' flanking region of the human ABO histo-blood group gene is involved in negative regulation of gene expression.?2011

    • 著者名/発表者名
      Sano R, Nakajima T, Takahashi K, Kubo R, Yazawa S, Kominato Y.
    • 雑誌名

      Leg Med (Tokyo).

      巻: 13 ページ: 22-29

    • 査読あり
  • [雑誌論文] A case of fatal drug intoxication showing a high-density duodenal content by postmortem computed tomography.2011

    • 著者名/発表者名
      Sano R, Takahashi K, Kominato Y, Araki T, Yamamoto K, Takei H, Otake H, Awata S, Akuzawa H, Tago Y, Aoki H
    • 雑誌名

      Leg Med (Tokyo).

      巻: 13 ページ: 39-40

    • 査読あり
  • [雑誌論文] 低酸素による核酸分解酵素DNASEI遺伝子の転写調節2010

    • 著者名/発表者名
      佐野利恵, 中島たみ子, 小湊慶彦, 加藤恵理子, 高士祐一, 新田みなみ, 山根庸弘, 藤原純子, 竹下治男, 植木美鈴, 安田年博
    • 雑誌名

      DNA多型

      巻: 18 ページ: 278-282

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Comparison of methods of detecting bacterial biofilm.2010

    • 著者名/発表者名
      Tajima Y, Yamaguchi T, Takagi R, Nakajima T, Kominato Y.
    • 雑誌名

      Clin Lab.

      巻: 56 ページ: 143-147

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Genetic and expression analysis of all 7 non-synonymous single nucleotide polymorphisms in the human deoxyribonuclease II gene, with potential relevance to autoimmunity.2010

    • 著者名/発表者名
      Ueki M, Takeshita H, Fujihara J, Kimura-Kataoka K, Iida R, Yuasa I, Nakajima T, Kominato Y, Yasuda T.
    • 雑誌名

      Clin Chim Acta.

      巻: 411 ページ: 92-98

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Genetic and expression analysis of all non-synonymous single nucleotide polymorphisms in the human deoxyribonuclease I-like 1 and 2 genes.2010

    • 著者名/発表者名
      Ueki M, Fujihara J, Takeshita H, Kimura-Kataoka K, Iida R, Nakajima T, Kominato Y, Yuasa I, Yasuda T.
    • 雑誌名

      Electrophoresis.

      巻: 31 ページ: 2063-2069

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Detection of allogeneic blood group A and B enzyme activities in patients with ABO incompatible kidney transplantation.2010

    • 著者名/発表者名
      Tasaki M, Nakajima T, Imai N, Nakagawa Y, Saito K, Takahashi K, Yazawa S.
    • 雑誌名

      Glycobiology.

      巻: 20 ページ: 1251-1258

    • 査読あり
  • [雑誌論文] DNase I13遺伝子の非同義置換型SNPにおけるコーカソイド特異的アレルは不活性な酵素を産生する2010

    • 著者名/発表者名
      藤原純子, 竹下治男, 中島たみ子, 小湊慶彦, 湯浅勲, 加藤秀章, 飯田礼子, 植木美鈴, 安田年博
    • 雑誌名

      DNA多型

      巻: 18 ページ: 259-263

    • 査読あり
  • [学会発表] DNase II遺伝子に座位する非同義置換型にSNPには不活性な酵素を産生するminor alleleが分布する2010

    • 著者名/発表者名
      藤原純子, 木村かおり, 竹下治男, 中島たみ子, 小湊慶彦, 湯浅勲, 飯田礼子, 植木美鈴, 安田年博
    • 学会等名
      日本DNA多型学会19回学術集会
    • 発表場所
      静岡
    • 年月日
      2010-11-18
  • [学会発表] 動物種特異的臓器分布から明らかにされたDNase Iの分子進化2010

    • 著者名/発表者名
      藤原純子, 竹下治男, 安田年博, 植木美鈴, 神田芳郎, 飯田礼子, 中島たみ子, 小湊慶彦
    • 学会等名
      日本DNA多型学会19回学術集会
    • 発表場所
      静岡
    • 年月日
      2010-11-18
  • [学会発表] 火災現場から発見された高度焼損死体で射創が見出された一例2010

    • 著者名/発表者名
      佐野利恵, 高橋圭子, 小湊慶彦
    • 学会等名
      第79次日本法医学会学術関東地方集会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      2010-10-30
  • [学会発表] 群馬大学におけるAiの実際2010

    • 著者名/発表者名
      佐野利恵, 中島たみ子, 高橋圭子, 小湊慶彦
    • 学会等名
      第94次日本法医学会総会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      2010-06-25
  • [学会発表] 哺乳類DNase IにおけるN-グリコシド型糖鎖解析2010

    • 著者名/発表者名
      藤原純子, 木村かおり, 竹下治男, 安田年博, 飯田礼子, 小湊慶彦, 佐野利恵, 中島たみ子
    • 学会等名
      第94次日本法医学会総会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      2010-06-25
  • [学会発表] サンドイッチELISA法による血清DNase I蛋白量の測定2010

    • 著者名/発表者名
      中島たみ子, 佐野利恵, 藤原純子, 竹下治男, 安田年博, 小湊慶彦
    • 学会等名
      第94次日本法医学会総会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      2010-06-24

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公開日: 2012-07-19  

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