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2010 年度 実績報告書

急性心筋梗塞診断用マイクロ流路デバイス型DNase I活性測定法開発

研究課題

研究課題/領域番号 21659175
研究機関島根大学

研究代表者

竹下 治男  島根大学, 医学部, 教授 (90292599)

キーワードDNase I / 疾患感受性遺伝子 / 心筋梗塞 / DNASE1*1 / DNASE1*2 / 遺伝的多型形質 / マイクロ流路デバイス / DNaseI 活性測定法開発
研究概要

DNase I活性の測定は既報では、5-10時間と時間を要することから、微量な試料から迅速(5分程度)に活性を測定する方法の開発が望まれる。そこで本研究では、マイクロ流路技術を用いて、微量な血清試料におけるDNase I活性の迅速測定法の開発を試みた。マイクロ流路用のサイズスタンダードDNA(100bp、800bp:濃度2ng/ml,HITACHI)にDNase I (TaKaRa)を加え、37℃でインキュベートを行い、マイクロ流路上で電気泳動後、蛍光強度の変化を調べ、時間依存性と活性依存性について解析を行った。マイクロ流路上で泳動後、本来の長さのサイズスタンダードDNAが泳動される位置のDNA量は数分で減少し、この現象はDNase I活性量に比例することから、サイズスタンダードDNA分解に基づく蛍光の減少で、DNase I活性を高感度、迅速かつ簡便に定量化できる可能性が示唆された。マイクロ流路技術により心筋梗塞の早期診断マーカーとして有用なDNase Iの高感度迅速簡便定量が可能であることを確認した。急性心筋梗塞の診断領域に新しい、優秀な生化学的マーカー追加することになり、患者のみならず医師など医療関係者にとって大きな福音になろう。また、この測定法は極めて汎用性があり、他の核酸分解酵素一般、とくにエンドヌクレアーゼの、アイソトープを使用しない簡便・迅速な超高感度活性測定法として利用できる。したがって、多くの生化学研究者にとって極めて有用な方法となろう。
さらに、我々は、DNase Iは単なる消化酵素でなく、未知な、新しい生物学的役割を担っていると考えている。いままで測定できなかったような超微量な酵素を正確に定量できるようになることから、上記の仮定を証明するため、この研究で開発された方法は有力な武器になり、DNase I研究に新しい局面の展開を期待できる。

  • 研究成果

    (19件)

すべて 2010

すべて 雑誌論文 (9件) (うち査読あり 7件) 学会発表 (10件)

  • [雑誌論文] Global analysis of genetic variation in human arsenic (+3 oxidation state) methyltransferase (AS3MT).2010

    • 著者名/発表者名
      Fujihara J, Soejima M, Yasuda T, Koda Y, Agusa T, Kunito T, Tongu M, Yamada T, Takeshita H.
    • 雑誌名

      Toxicol Appl Pharmacol.

      巻: 243 ページ: 292-299

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Genetic and expression analysis of all 7 non-synonymous single nucleotide polymorphisms in the human deoxyribonuclease II gene, with potential relevance to autoimmunity.2010

    • 著者名/発表者名
      Ueki M, Takeshita H, Fujihara J, Kimura-Kataoka K, Iida R,Yuasa Y, Nakajima T, Kominato Y, Yasuda T.
    • 雑誌名

      Clin Chim Acta

      巻: 411 ページ: 92-98

    • 査読あり
  • [雑誌論文] A biochemical and genetic study on all non-synonymous single nucleotide polymorphisms of the gene encoding human deoxyribonuclease I potentially relevant to autoimmunity.2010

    • 著者名/発表者名
      Yasuda T, Ueki M, Takeshita H, Fujihara J, Kimura-Kataoka K, Iida R, Tsubota E, Soejima M, Koda Y, Kato H, Panduro A.
    • 雑誌名

      Int J Biochem Cell Biol.

      巻: 42 ページ: 1216-1225

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Global analysis of single nucleotide polymorphisms in the exons of human deoxyribonuclease I-like 1 and 2 genes.2010

    • 著者名/発表者名
      Fujihara J, Yasuda T, Iida R, Kimura-Kataoka K, Soejima M, Koda Y, Kato H, Panduro A, Yuasa I, Takeshita H.
    • 雑誌名

      Electrophoresis

      巻: 31 ページ: 3552-3557

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Genetic polymorphisms in glutathione S-transferase (GST) superfamily and arsenic metabolism in residents of the Red River Delta, Vietnam.2010

    • 著者名/発表者名
      Agusa T, Iwata H, Fujihara J, Kunito T, Takeshita H, Minh TB, Trang PT, Viet PH, Tanabe S.
    • 雑誌名

      Toxicol Appl Pharmacol

      巻: 242 ページ: 352-362

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Genetic and expression analysis of all non-synonymous single nucleotide polymorphisms in the human deoxyribonuclease I-like 1 and 2 genes.2010

    • 著者名/発表者名
      Ueki M, Fujihara J, Takeshita H, Kimura-Kataoka K, Iida R, Nakajima T, Kominato Y, Yuasa I, Yasuda T.
    • 雑誌名

      Electrophoresis

      巻: 31 ページ: 2063-2069

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Exposure, metabolism, and health effects of arsenic in residents from arsenic-contaminated groundwater areas of Vietnam and Cambodia : a review.2010

    • 著者名/発表者名
      Agusa T, Kunito T, Kubota R, Inoue S, Fujihara J, Minh TB, Ha NN, Tu NP, Trang PT, Chamnan C, Takeshita H, Iwata H, Tuyen BC, Viet PH, Tana TS, Tanabe S.
    • 雑誌名

      Rev Environ Health

      巻: 25 ページ: 193-220

    • 査読あり
  • [雑誌論文] DNase Il3遺伝子の非同義置換型SNPにおけるコーカソイド特異的アレルは不活性な酵素を産生する2010

    • 著者名/発表者名
      藤原純子, 中島たみ子, 小湊慶彦, 湯浅勲, 加藤秀章, 飯田礼子, 植木美鈴, 安田年博, 竹下治男
    • 雑誌名

      DNA多型

      巻: 17 ページ: 259-263

  • [雑誌論文] mtDNA配列による迅速簡便なヤマトシジミの同定および産地判別の検討2010

    • 著者名/発表者名
      藤原純子, 竹下治男, 阿草哲郎, 藤田恭久, 中村幹雄, 鴛海智佳, 細澤豪志, 植木美鈴, 飯田礼子
    • 雑誌名

      DNA多型

      巻: 17 ページ: 109-112

  • [学会発表] Deoxyribonuclease II (DNase II)遺伝子に座位する非同義置換型SNPには不活性な酵素を産生するminor alleleが分布する2010

    • 著者名/発表者名
      藤原純子, 木村かおり, 竹下治男, 中島たみ子, 小湊慶彦, 湯浅勲, 飯田礼子, 植木美鈴, 安田年博
    • 学会等名
      日本DNA多型学会第19回学術集会
    • 発表場所
      三島
    • 年月日
      20101118-20101119
  • [学会発表] 動物種特異的臓器分布から明らかにされたDNase Iの分子進化2010

    • 著者名/発表者名
      藤原純子, 竹下治男, 安田年博, 植木美鈴, 飯田礼子, 中島たみ子, 小湊慶彦
    • 学会等名
      日本DNA多型学会第19回学術集会
    • 発表場所
      三島
    • 年月日
      20101118-20101119
  • [学会発表] 亜ヒ酸製剤を投与された急性前骨髄球性白血病(APL)患者の血清および尿中ヒ素化合物濃度と尿中8-OHdG分析2010

    • 著者名/発表者名
      藤原純子, 阿草哲郎, 金井理恵, 長谷川正紀, 山口清次, 竹下治男
    • 学会等名
      日本法中毒学会第29年会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      20100723-20100724
  • [学会発表] 哺乳類DNase IにおけるN-グリコシド型糖鎖解析.2010

    • 著者名/発表者名
      藤原純子, 木村かおり, 竹下治男, 安田年博, 飯田礼子, 小湊慶彦, 佐野利恵, 中島たみ子
    • 学会等名
      第94次日本法医学会総会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      20100623-20100625
  • [学会発表] DNase I及びDNase II遺伝子exon内SNP検索:集団調査及び酵素活性に及ぼす変異の影響.2010

    • 著者名/発表者名
      木村かおり, 藤原純子, 竹下治男, 飯田礼子, 安田年博, 副島美貴子, 神田芳郎, 加藤秀章
    • 学会等名
      第94次日本法医学会総会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      20100623-20100625
  • [学会発表] サンドイッチELISA法による血清DNase I蛋白量の測定2010

    • 著者名/発表者名
      中島だみ子, 佐野利恵, 藤原純子, 竹下治男, 安田年博, 小湊慶彦
    • 学会等名
      第94次日本法医学会総会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      20100623-20100625
  • [学会発表] 酸化亜鉛ナノ粒子によるエチジウムブロマイド発光強度上昇の検討2010

    • 著者名/発表者名
      藤原純子, 竹下治男, 藤田恭久
    • 学会等名
      ナノ学会第8回大会
    • 発表場所
      岡崎
    • 年月日
      20100513-20100515
  • [学会発表] 法医学的個人識別を応用したしじみ等食品技術開発.2010

    • 著者名/発表者名
      藤原純子, 藤田恭久, 竹下治男
    • 学会等名
      起源分析技術研究懇談会第4回講演会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      2010-11-30
  • [学会発表] DNase Iの動物種別臓器分布からの分子進化的考察2010

    • 著者名/発表者名
      大野怜一朗, 藤原純子, 植木美鈴, 安田年博, 木村かおり, 大塚洋輔, 頓宮美樹, 山田高也, 飯田礼子, 竹下治男
    • 学会等名
      第27回日本法医学会中四国地方会
    • 発表場所
      徳島
    • 年月日
      2010-10-16
  • [学会発表] メタロチオネインMT2A(-209A/G)多型の頻度分布とアルカリフォスファターゼ(ALP)活性との相関解析2010

    • 著者名/発表者名
      大塚洋輔, 藤原純子, 大野怜一朗, 木村かおり, 頓宮美樹, 山田高也, 福井裕, 藤田恭久, 竹下治男
    • 学会等名
      第27回日本法医学会中四国地方会
    • 発表場所
      徳島
    • 年月日
      2010-10-16

URL: 

公開日: 2012-07-19  

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