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2010 年度 実績報告書

運動器再生医療を目指した多能性幹細胞から間葉系細胞への分化誘導シグナルの探索

研究課題

研究課題/領域番号 21659347
研究機関東京大学

研究代表者

中村 耕三  東京大学, 医学部附属病院, 教授 (60126133)

研究分担者 松原 全宏  東京大学, 医学部附属病院, 助教 (40361498)
齋藤 琢  東京大学, 医学部附属病院, 特任准教授 (30456107)
キーワード四肢機能再建学 / 幹細胞
研究概要

間葉系マーカーであるPRX1、PRX2の種間で高度に保存されている近位3kbの配列を用いたルシフェラーゼレポーターアッセイにて、NFkBシグナルの主な転写因子であるRELAがPRX1、PRX2をともに強力に活性化し、またCREB/ATFファミリー分子がPRX1プロモーターを、KLFファミリー分子がPRX2プロモーターを、それぞれ選択的に強力に活性化することが判明した。プロモーターのデリーションアッセイにてそれぞれの応答部位を同定した。Prx1については、さらにその応答部位を中心に40bpほどの配列をタンデムに重ねてベーサルプロモーターに繋げ、蛍光蛋白EGFPを接合させることで、強力な蛍光レポーターカセットを作成した。これらをレンチウイルスベースに組み替え、iPS細胞に安定導入することを試みたが成功に至らなかったため、iPS樹立前の体細胞に一旦安定導入してからiPS細胞を樹立した。このiPS細胞はレチノイン酸をベースにした間葉系分化誘導法によって良好な発光を呈したため、この蛍光モニタリングシステムを用いて発現クローニングを行い、複数の間葉系誘導能を持つと予想される候補分子を得た。このうち転写因子p53のファミリー分子については、未分化間葉系細胞の凝集段階において強く発現することが確かめられた。しかしながらこの分子については発現ベクターを作成してウイルスベースで導入してもマウスES細胞やiPS細胞を間葉系に誘導する有効な効果は認められなかった。現在は他の候補分子について発現と機能の両面から解析を行っている。

  • 研究成果

    (13件)

すべて 2011 2010 その他

すべて 雑誌論文 (11件) (うち査読あり 11件) 学会発表 (1件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] Association of Knee Osteoarthritis with the Accumulation of Metabolic Risk Factors Such as Overweight, Hypertension, Dyslipidemia, and Impaired Glucose Tolerance in Japanese Men and Women : The ROAD Study.2011

    • 著者名/発表者名
      Yoshimura N, Nakamura K, et al.
    • 雑誌名

      J Rheumatol

      巻: Epub

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Reduction of Peritendinous adhesions by hydrogel containing biocompatible phospholipid polymer MPC for tendon repair.2011

    • 著者名/発表者名
      Ishiyama N, Nakamura K, et al.
    • 雑誌名

      J Bone Joint Surg Am

      巻: 93 ページ: 142-9

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Acute Cervical Spinal Cord Injury Complicated by Pre-existing Ossification of the Posterior Longitudinal Ligament : A Multi-center Study.2011

    • 著者名/発表者名
      Chikuda H, Nakamura K, et al.
    • 雑誌名

      Spine

      巻: Epub

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Capacity of endogenous sex steroids to predict bone loss in Japanese men : 10-year follow-up of the Taiji Cohort Study.2011

    • 著者名/発表者名
      Yoshimura N, Nakamura K, et al.
    • 雑誌名

      J Bone Miner Metab

      巻: 29 ページ: 96-102

    • 査読あり
  • [雑誌論文] A local application of recombinant human fibroblast growth factor 2 for tibial shaft_fractures : A randomized, placebo-controlled trial.2010

    • 著者名/発表者名
      Kawaguchi H, Nakamura K, et al.
    • 雑誌名

      J Bone Miner Res

      巻: 25 ページ: 2459-67

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Transcriptional regulation of endochondral ossification by HIF-2alpha during skeletal growth and osteoarthritis development.2010

    • 著者名/発表者名
      Saito T, Nakamura K, et al.
    • 雑誌名

      Nat Med

      巻: 16 ページ: 678-86

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Impact of knee and low back pain on health-related quality of life in Japanese women : the Research on Osteoarthritis Against Disability (ROAD).2010

    • 著者名/発表者名
      Muraki S, Nakamura K, et al.
    • 雑誌名

      Mod Rheumatol

      巻: 20 ページ: 444-51

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Identification of oxytetracycline as a chondrogenic compound using a cell-based screening system.2010

    • 著者名/発表者名
      Hojo H, Nakamura K, et al.
    • 雑誌名

      J Bone Miner Metab

      巻: 28 ページ: 627-33

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Predictors of residual symptoms in lower extremities after decompression surgery on lumbar spinal stenosis.2010

    • 著者名/発表者名
      Hara N, Nakamura K, et al.
    • 雑誌名

      Eur Spine J

      巻: 19 ページ: 1849-54

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Correlation between pyramidal signs and the severity of cervical myelopathy.2010

    • 著者名/発表者名
      Chikuda H, Nakamura K, et al.
    • 雑誌名

      Eur Spine J

      巻: 19 ページ: 1684-9

    • 査読あり
  • [雑誌論文] The prevention of peritendinous adhesions by a phospholipid polymer hydrogel formed in situ by spontaneous intermolecular interactions.2010

    • 著者名/発表者名
      Ishiyama N, Nakamura K, et al.
    • 雑誌名

      Biomaterials

      巻: 31 ページ: 4009-16

    • 査読あり
  • [学会発表] A transcription factor p63 controls extensive steps of endochondral ossification through distinct functions of the isoforms.2010

    • 著者名/発表者名
      Taniguchi Y, Saito T, Nakamura K, et al.
    • 学会等名
      32th annual meeting of the American Society for Bone and Mineral Research
    • 発表場所
      Toronto, Canada
    • 年月日
      2010-10-16
  • [備考]

    • URL

      http://www.h.u-tokyo.ac.jp/ortho/

URL: 

公開日: 2012-07-19  

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