| 研究課題/領域番号 |
21659353
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
村瀬 剛 大阪大学, 医学系研究科, 講師 (50335361)
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| 研究分担者 |
吉川 秀樹 大阪大学, 医学系研究科, 教授 (60191558)
森友 寿夫 大阪大学, 医学系研究科, 助教 (00332742)
岡田 潔 大阪大学, 医学部附属病院, 医員 (40576279)
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| キーワード | 末梢神経障害 / イメージング / ML-LBP21 |
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| 研究概要 |
我々は、末梢神経を特異的に侵す疾病(帯状疱疹やハンセン病など)の原因となる帯状疱疹ウイルスやM.Lepraeに焦点を当て、まずゲノムライブラリーの入手を行った。まず最初のステップとしてハンセン病の原因菌であるM.Lepraeに注目して研究を進めた。M.Lepraeは末梢神経に特異的に親和性を示すことが知られており、その原因タンパク質とされるML-LBP21に焦点をあわせて研究を進めてきた。本年度は、入手したM.Lepraeのゲノムライブラリーに基づき、そこからML-LBP21のクローニングを様々な塩基配列を選択して行った。クローニングを行ったML-LBP21について、大腸菌を用いたタンパク質精製を行い、高純度のタンパク質精製、分離を行った。また、マウス、ラットより後根神経節細胞、およびシュワン細胞を採取し、末梢神経系細胞の初代培養及び共培養径を確立して行った。精製したタンパク質でマイクロビーズ表面にコーティングを行い、ML-LBP21-マイクロビーズ複合体をシュワン細胞と共に培養したところ、コントロールタンパク質をコーティングしたマイクロビーズと共に培養したシュワン細胞に比べて、有意なマイクロビーズのシュワン細胞内への取り込みの増加が認められた。本結果から、ML-LBP21がシュワン細胞表面のタンパク質に親和性を示したものと考えられた。また、ML-LBP21のどの部位のアミノ酸配列(分子構造)がシュワン細胞表面に親和性を示すのかに関して、N末端側の30-40塩基配列が関わっている可能性が示唆される結果を得た。以上の結果から、ML-LBP21をマーカーとして利用することにより、シュワン細胞が局所的に増殖する末梢神経障害部位を鋭敏に検出する新しい画像検査方法につながる可能性が示唆された。
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