マイクロアレイ・プロテオミクス技術を駆使した卵巣癌の予後規定因子の網羅的探索

2010 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 21659386
• 研究機関: 奈良県立医科大学
• 研究代表者: 金山 清二 奈良県立医科大学, 医学部, 博士研究員 (10423914)
• 研究分担者: 小林 浩 奈良県立医科大学, 医学部, 教授 (40178330) ; 大井 豪一 奈良県立医科大学, 医学部, 准教授 (10283368) ; 山田 嘉彦 奈良県立医科大学, 医学部, 講師 (80275346)
• キーワード: 卵巣漿液性腺癌 / 卵巣明細胞腺癌 / マイクロアレイ / プロテオミクス / 予後因子

研究概要

【予後推定遺伝子の抽出】
我々は予後の判明している卵巣漿液性腺癌組織を用いて、マイクロアレイ解析を実施して悪性度を推定する遺伝子の網羅的解析を実施した結果、12遺伝子の過剰発現あるいはリン酸化が起こることを確認した。これらは癌細胞の増殖、細胞分裂、アポトーシス、浸潤能が促進された結果であることを確認した。さらにこれらの遺伝子を含めてパスウエイ解析およびGene Ontology解析を行った結果、卵巣がんの悪性度を規定する因子として上皮・間葉移行epithelial-mesenchymal transition(EMT)関連遺伝子が最重要因子として抽出された。
一方、卵巣明細胞腺癌では悪性を反映する遺伝子プロファイルが漿液性腺癌とは異なっていた。明胞腺癌の予後不良因子として薬剤感受性低下関連遺伝子、解毒遺伝子、細胞周期遺伝子が予後規定因子が同定され、これらの遺伝子発現は酸化ストレスと密接に関連していることが判明した。酸化ストレス過剰の原因か結果かは不明であるが、転写因子hepatocyte nuclear factor (HNF)-1betaが過剰発現しており、この遺伝子下流の70%に解毒遺伝子が存在していた。
【HNF-1beta遺伝子ノックダウンによる結果】
HNF-1betaをノックダウンすることによりアポトーシスを誘導すること、薬剤感受性が亢進すること、細胞周期停止が解除されることを確認した。
【免疫染色法・血清測定法の確立】
上記のマイクロアレイおよびプロテオミクス解析により過剰発現しているEMT関連蛋白およびHNF-1betaを免疫組織染色することにより、予後不良漿液性腺癌、明細胞腺癌に特異的に過剰発現していることを確認した。現在、各種因子を血中で測定するために免疫比濁法(ナノセンサー、ネットフォース株式会社製)・ELISAで測定している。

研究成果

• [雑誌論文] New insights into the pathophysiology of endometriosis : from chronic inflammation to danger signal (2011)
  • 著者名/発表者名: Kajihara H, Yamada Y, Kanayama S, Furukawa N, Noguchi T, Haruta S, Yoshida S, Sado T, Oi H, Kobayashi H
  • 雑誌名: Gynecol Endocrinol 巻: 27 ページ: 73-79
  • 査読あり
• [雑誌論文] Risk of carcinoma in women with ovarian endometrioma (2011)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi H, Kajihara H, Yamada Y, Tanase Y, Kanayama S, Furukawa N, Noguchi T, Haruta S, Yoshida S, Naruse K, Sado T, Oi H
  • 雑誌名: Front Biosci (Elite Ed) 巻: 1 ページ: 529-539
  • 査読あり
• [雑誌論文] Anti-inflammatory actions of serine protease inhibitors containing the Kunitz domain (2010)
  • 著者名/発表者名: Shigetomi H, Onogi A, Kajiwara H, Yoshida S, Furukawa N, Haruta S, Tanase Y, Kanayama S, Noguchi T, Yamada Y, Oi H, Kobayashi H.
  • 雑誌名: Inflamm Res 巻: 59 ページ: 679-687
  • 査読あり
• [雑誌論文] Clear cell carcinoma of the ovary : potential pathogenic mechanisms (2010)
  • 著者名/発表者名: Kajihara H, Yamada Y, Kanayama S, Furukawa N, Noguchi T, Haruta S, Yoshida S, Sado T, Oi H, Kobayashi H.
  • 雑誌名: Oncol Rep 巻: 23 ページ: 1193-1203
  • 査読あり
• [雑誌論文] The usefulness of photodynamic eye for sentinel lymph node identification in patients with cervical cancer (2010)
  • 著者名/発表者名: Furukawa N, Oi H, Yoshida S, Shigetomi H, Kanayama S, Kobayashi H
  • 雑誌名: Tumori. 巻: 1 ページ: 936-940
  • 査読あり
• [学会発表] 卵巣明細胞腺癌における転写因子EWF-1betaのターゲット遺伝子の網羅的検索 (2010)
  • 著者名/発表者名: 重富洋志, 金山清二, 梶原宏貴, 山田嘉彦, 大井豪一, 小林浩
  • 学会等名: 第19回日本がん転移学会
  • 発表場所: 金沢
  • 年月日: 20100616-20100617
• [学会発表] 卵巣明細胞腺癌における転写因子HNF-1betaのターゲット遺伝子の網羅的検索 (2010)
  • 著者名/発表者名: 梶原宏貴, 山田嘉彦, 重富洋志, 川口龍二, 大井豪一, 金山清二, 平嶋泰之, 小林浩
  • 学会等名: 第62回日本産科婦人科学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20100423-20100425