| 研究概要 |
排卵は,下垂体から分泌されたLHが顆粒膜細胞を刺激し,その結果,時期特異的な遺伝子発現が誘起される結果,卵子が成熟し,顆粒膜細胞が黄体化する現象である.この時期特異的な遺伝子発現は,転写因子の活性化による遺伝子発現の開始と,転写因子の活性低下やmRNAの分解による翻訳抑制により,制御されていると考えられる.本研究では,遺伝子発現の開始について,顆粒膜細胞のERK1/2系に着目し,その顆粒膜細胞特異的遺伝子欠損マウスの解析結果から,C/EBP転写因子を介した遺伝子発現が排卵に必須であることを初めて明らかとした.この制御される遺伝子の中にNRG1があり,おもしろいことにNRG1は3'側のアンチセンス鎖においてもNFkBやStatにより制御されるプロモーター領域が存在した.このセンス鎖とアンチセンス鎖両方のプロモーター活性をluciferase assayにより検討した結果,in vitroではLH様刺激により,両者が同時に活性化することが見いだされた.さらにin vitroの顆粒膜細胞の培養系ではNrg1発現が見られないことから,Nrg1はセンス鎖をERK1/2-C/EBP系により発現制御され,その後排卵機構期で活性化されるStatやNFkBを介してアンチセンス鎖が発現することで,時期特異的な遺伝子発現が制御されていると考えられた.この時期特異的な発現を考慮した培養系でブタCOCを培養した結果,卵子の成熟率が向上し,多くの受精卵が胚盤胞期胚へと到達した.現在,顆粒膜細胞特異的なNrg1 KO miceを作製しているところであり,より詳細な発現制御系の解析とCOCの体外成熟培養系の開発を進めている.
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