|
H22年度は、H21年度で得られたシーズとなりうるものからより詳細に解析することにより新規治療法の対象となる可能性のあるものを選択することに主に焦点を当てた。
(1)H21年度に得られたリンパ腫腫瘍細胞株に対するモノクローナル抗体ライブラリーから、リンパ腫腫瘍細胞株8種類に対してより多くの結合性が認められる抗体を産生するハイブリドーマを選択した(mAb6-1)。さらに、パニング法を用いて、mAb6-1の認識する抗原を同定した。得られた抗原は、イヌPSGL-1(Pセレクチン糖蛋白リガンドー1)であった。
このイヌPSGL-1を強制発現した細胞に対する残りのmAb6-1以外のハイブリドーマライブラリー由来抗体の反応性を検討したところ、さらに12個のハイブリドーマも同様にイヌPSGL-1を認識することが確認された。このことは、免疫に用いた腫瘍細胞に高発現するイヌPSGL-1に対して高率に抗体が産生されたことを意味している。さらに、これらイヌPSGL-1を認識する13個のmAbの機能解析を行なったところ、13個の抗体はすべてが、PSGL-1上のO結合型糖鎖を認識し、そのエピトープ認識様式から5種類に分類されることが判明した。
(2)イヌのリンパ腫に特異的に発現する遺伝子解析については、正常犬由来T細胞と比較して5倍以上発現量が増加しており、ヒトおよびマウスにおいてすでに機能が同定されているもの20種類を選択し、リンパ腫腫瘍細胞株および症例由来mRNAを用いてそれら発現を解析中である。
|
