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本研究はアルツハイマー病(Alzheimer's disease : AD)脳に特異的に蓄積するAβの産生を担う酵素であるγ-Secretaseに関して、プロテオミクスの手法を用いてγ-Secretase結合蛋白質を同定し、γ-Secretaseの酵素活性や細胞内局在に影響を及ぼす蛋白質を多角的なスクリーニング方法を用いて探索する。その中でも特にリピッドマイクロドメインへのγ-Secretase複合体の局在に着目し、リピッドマイクロドメインを構成する蛋白質によるγ-Secretaseの機能制御メカニズムの解明を目指し、ひいてはγ-Secretaseを標的としたAD治療法開発の手がかりをつかむことを目指すものである。
我々は培養細胞から活性型γ-Secretaseを生化学的に精製する方法を確立し、LC-MS/MS解析により、γ-Secretase複合体に結合するタンパク質を網羅的に同定した。その中から、複数の検討で同定されたテトラスパニンおよびテトラスパニン結合蛋白質に着目した。これらの分子は培養細胞系において内因性発現のレベルでγ-Secretase複合体に結合していること、これらの分子のRNAi法によるノックダウンにより、γ-Secretase活性が変化することを見出した。今後は、この脂質ラフト様のマイクロドメインがγ-Secretaseによる複数の基質の切断に及ぼす影響や、ノックアウトマウスなどを用いたin vivoでの相互作用について、検討を進めていく。
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