DNA複製及び転写に対するDNAータンパク質クロスリンク損傷の影響

2010 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 21710059
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 放射線・化学物質影響科学
• 研究機関: 広島大学
• 研究代表者: 中野 敏彰 広島大学, 大学院・理学研究科, 助教 (10526122)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2010
• キーワード: 修復 / 複製 / 転写

研究概要

DNA-タンパク質クロスリンク(DPC)は非常にbulkyなゲノム損傷であり、ヌクレオチド除去修復ではほとんど修復されない。したがって、DNA複製や転写に重篤な影響をおよぼすことが予想される。本研究では、部位特異的にDPCを含むDNA基質を調製し、DNA複製および転写に対する影響をin vitroで検討することを目的とした。複製ヘリカーゼであるDnaBに対する影響を検討した結果、ラギング鎖にDPCがある場合、DnaBの進行はDPCのサイズ依存的に阻害されるが、リーディング鎖にDPCがある場合、その進行は阻害されないことが明らかとなった。現在、転写に対する影響を検討するため、転写鎖および非転写鎖にDPCを含む鋳型DNAの構築が完了し、T7RNAポリメラーゼの転写反応に対する影響の検討を進めている。

研究成果

• [雑誌論文] Repair and biochemical effects of DNA-protein crosslinks (2011)
  • 著者名/発表者名: Ide H., Shoulkamy M.I., Nakano T., Miyamoto-Matsubara M, Salem A.
  • 雑誌名: Mutat.Res. in press
• [雑誌論文] Genetics analysis of repair and damage tolerance mechanisms for DNA-protein crosslinks in Escherichia coli. (2009)
  • 著者名/発表者名: Amir M.H., Nakano, T., Matoba N., Tuboi, T., Terato H., Yamamoto.K., Yamada.M, Nohmi.T., Ide H.
  • 雑誌名: Journal of Bacteriology 191(18) ページ: 5657-5668
• [雑誌論文] Homologous recombination but not nucleotide excision repair plays a pivotal role in tolerance to DNA-protein crosslinks in mammalian cells. (2009)
  • 著者名/発表者名: Nakano, T., Katafuchi A., Matubara M., Terato H., Tuboi.T., Pack S.P., Makino K., Tauchi H, Ide H.
  • 雑誌名: J.Biol.Chem. 284(40) ページ: 27065-27076
• [学会発表] 試験管内反応を用いたDNA-タンパク質クロスリンク損傷の転写反応阻害の検討 (2010)
  • 著者名/発表者名: 中野敏彰, その他(3名)
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸市
  • 年月日: 2010-12-08
• [学会発表] Assesment of the activity of mammalian nucleotie excision repair for superbulky DNA lesions, 11th International Workshop on Radiation (2010)
  • 著者名/発表者名: Toshiaki Nakano, et al.(3名)
  • 学会等名: Damage to DNA
  • 発表場所: Atlanta, USA
  • 年月日: 2010-05-15
• [学会発表] Activities of bacterial and human nucleotide excision repair systems for DNA-protein crosslink damage (2009)
  • 著者名/発表者名: Toshiaki Nakano, et al.(3名)
  • 学会等名: ASM Conference on DNA Repair and Mutagenesis: From Molecular Structure to Human Disease
  • 発表場所: Whistler, Canada
  • 年月日: 2009-06-02
• [備考] 遺伝子化学研究室ホームページ
  • URL: http://home.hiroshima-u.ac.jp/genechem/index.html