生細胞内RNAの効率的時空間解析のための励起子制御型汎用的タグシステム

2010 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 21750182
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 生体関連化学
• 研究機関: 独立行政法人理化学研究所
• 研究代表者: 久保田 健 独立行政法人理化学研究所, 岡本独立主幹研究ユニット, 基幹研究所研究員 (40455340)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2010
• キーワード: 蛍光イメージング / RNA / 人工核酸 / マイクロインジェクション

研究概要

プローブと、それが特異的に認識するタグを組み合わせることで、生きた細胞内のmRNAの局在を効率的に画像化する技術の開発を目指した。ここで用いたプローブとは蛍光性物質を結合させた20塩基程度の核酸である。タグとはプローブの相補配列であり、ターゲットとなるmRNAに組み込んだ。プローブは培養した細胞に直接注入し、タグを付加されたmRNAはベクターを利用して細胞内で発現させた。このプローブ-タグペアを利用することで生細胞内のmRNAを顕微鏡下で画像化することに成功した。

研究成果

• [雑誌論文] Sets of RNA Repeated Tags and Hybridization-Sensitive Fluorescent Probes for Distinct Images of RNA in a Living Cell. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kubota T, Ikeda S, Yanagisawa H, Yuki M, Okamoto A.
  • 雑誌名: PLoS ONE. 5 ページ: e13003
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hybridization-sensitive fluorescent DNA probe with self-avoidance ability. (2010)
  • 著者名/発表者名: Ikeda S, Kubota T, Yuki M, Yanagisawa H, Tsuruma S, Okamoto A.
  • 雑誌名: Org Biomol Chem. 8 ページ: 546-551
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hybridization-Sensitive Fluorescent Probe for Long-Time Monitoring of Intracellular RNA. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kubota T, Ikeda S, Yanagisawa H, Yuki M, Okamoto A.
  • 雑誌名: Bioconjugate Chem 20 ページ: 1256-1261
  • 査読あり
• [雑誌論文] Exciton-Controlled Hybridization-Sensitive Fluorescent Probes : New Approach to Multicolor Detection of Nucleic Acids. (2009)
  • 著者名/発表者名: Ikeda S, Kubota T, Yuki M, Okamoto A.
  • 雑誌名: Angew Chem Int Ed 48 ページ: 6480-6484
  • 査読あり
• [学会発表] タグ-プローブペアを利用した生細胞内mRNAイメージング (2010)
  • 著者名/発表者名: 久保田健, 池田修司, 柳澤博幸, 結城瑞恵, 岡本晃充
  • 学会等名: 第20回アンチセンスシンポジウム
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20101202-20101203
• [学会発表] Hybridization dependent detection of transcribed tagged mRNAs in a living cell. (2010)
  • 著者名/発表者名: 久保田健, 池田修司, 柳澤博幸, 結城瑞恵, 岡本晃充
  • 学会等名: 第48回日本生物物理学会年会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 20100920-20100922
• [学会発表] 「プローブ-タグ」ペアを利用した生細胞内mRNA発現イメージング (2010)
  • 著者名/発表者名: 久保田健, 池田修司, 柳澤博幸, 結城瑞恵, 岡本晃充
  • 学会等名: 第19回日本バイオイメージング学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20100909-20100911
• [学会発表] エキシトンプローブを用いたmRNAイメージング (2010)
  • 著者名/発表者名: 久保田健, 池田修司, 柳澤博幸, 結城瑞恵, 岡本晃充
  • 学会等名: 第12回日本RNA学会年会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20100727-20100729
• [学会発表] 細胞内mRNAの長時間観察を可能にする蛍光核酸プローブ (2009)
  • 著者名/発表者名: 久保田健, 池田修司, 柳澤博幸, 結城瑞恵, 岡本晃充
  • 学会等名: 第47回日本生物物理学会年会
  • 発表場所: 徳島
  • 年月日: 20091030-20091101
• [学会発表] ハイブリダイゼーション依存蛍光核酸プローブによるmRNAのライブセルイメージング (2009)
  • 著者名/発表者名: 久保田健, 池田修司, 柳澤博幸, 結城瑞恵, 岡本晃充
  • 学会等名: 第24回生体機能関連化学シンポジウム
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 20090913-20090915
• [学会発表] ON-OFF蛍光オリゴ核酸プローブによるmRNAの長時間連続イメージング (2009)
  • 著者名/発表者名: 久保田健, 池田修司, 柳澤博幸, 結城瑞恵, 岡本晃充
  • 学会等名: 第18回日本バイオイメージング学会学術集会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 20090903-20090905
• [学会発表] 核酸検出のためのOn-Off蛍光プローブとその応用 (2009)
  • 著者名/発表者名: 久保田健, 池田修司, 柳澤博幸, 結城瑞恵, 岡本晃充
  • 学会等名: がん特定領域 若手ワークショップ
  • 発表場所: 蓼科
  • 年月日: 20090902-20090905
• [学会発表] 蛍光オリゴ核酸プローブの開発と生細胞RNAイメージング (2009)
  • 著者名/発表者名: 久保田健, 池田修司, 柳澤博幸, 結城瑞恵, 岡本晃充
  • 学会等名: 第11回日本RNA学会年会
  • 発表場所: 新潟
  • 年月日: 20090727-20090729
• [図書] 組織細胞化学2010(RNAの細胞内局在化の蛍光イメージング法) (2010)
  • 著者名/発表者名: 久保田健, 岡本晃充
  • 総ページ数: 111-121
  • 出版者: 日本組織細胞化学会
• [図書] 生物物理,49(光化学的に設計された新規蛍光核酸によるDNA/RNAイメージング) (2009)
  • 著者名/発表者名: 久保田健, 池田修司, 岡本晃充
  • 総ページ数: 310-313
  • 出版者: 日本生物物理学会
• [備考] ホームページ等
  • URL: http://www.riken.jp/lab-www/okamotoiru/indexj.htm