逆プロテオミクス研究を可能にする基盤技術の開発研究

2011 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 21760645
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 生物機能・バイオプロセス
• 研究機関: 静岡県立大学
• 研究代表者: 河原崎 泰昌 静岡県立大学, 食品栄養科学部, 准教授 (80303585)
• 研究協力者: 伊藤 圭祐 静岡県立大学, 食品栄養科学部, 助教 (40580460) ; 中野 秀雄 名古屋大学, 大学院・生命農学研究科, 教授 (00237348) ; 兒島 孝明 名古屋大学, 大学院・生命農学研究科, 助教 (40509080)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2011
• キーワード: バイオテクノロジー / プロテオーム / ゲノム / 蛋白質 / 酵素

研究概要

標的蛋白質間相互作用を特異的に阻害するペプチド・蛋白質断片の効率的創製法の開発研究を行った。相互作用領域の精密同定法を確立し、同定された相互作用領域およびその改変体が、生体内において標的相互作用を競合阻害することを明らかにした。より力価の高い阻害ペプチドの創製を容易にするため、新たな相互作用レポーターを開発し、これを基盤とした相互作用蛋白質の定量的高速スクリーニング系を構築し、スクリーニングを実施した。

研究成果

• [雑誌論文] High cell-density expression system : A novel method for extracellular production of "difficult-to-express" proteins (2012)
  • 著者名/発表者名: Kimata K., Yamaguchi M., Saito Y., Hata H., Miyake K., Yamane T., Nakagawa Y., Yano A., Ito K., and Kawarasaki Y
  • 雑誌名: J. Biosci. Bioeng 巻: 113 ページ: 154-159
  • DOI: doi:10.1016/j.jbiosc.2011.10.007
  • 査読あり
• [雑誌論文] Emulsion culture : A miniaturized library screening system based on micro-droplets in an emulsified medium (2011)
  • 著者名/発表者名: Kojima T, Nagao N, Ando D, Ojima T, Kawarasaki Y, Kobayashi I, Nakajima M, Nakano H
  • 雑誌名: J. Biosci. Bioeng 巻: 112 ページ: 299-303
  • DOI: doi:10.1016/j.jbiosc.2011.05.017
  • 査読あり
• [雑誌論文] Quantitative Y2H screening : Cloning and signal peptide engineering of a fungal secretory LacA gene and its application to yeast two-hybrid system as a quantitative reporter (2010)
  • 著者名/発表者名: Kamiya T, Ojima T, Sugimoto K, Nakano H, Kawarasaki Y
  • 雑誌名: J. Biotechnol 巻: 146 ページ: 151-159
  • DOI: doi:10.1016/j.jbiotec.2010.02.007
  • 査読あり
• [雑誌論文] A method for reverse interactome analysis : High-resolution mapping of interdomain interaction network in Dam1 complex and its specific disorganization based on interaction domain expression (2010)
  • 著者名/発表者名: Ikeuchi A., Kamiya T., Sugimoto K., Yamane T., Nakano H., and Kawarasaki Y
  • 雑誌名: Biotech. Progr 巻: 26 ページ: 945-53
  • DOI: DOI:10.1002/btpr.403
  • 査読あり
• [学会発表] Mad2高結合型ペプチドの動力学的解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 杉本渓、杉本佳乃子、伊藤圭祐、河原崎泰昌
  • 学会等名: 第13回静岡ライフサイエンスシンポジウム
  • 発表場所: 静岡
  • 年月日: 20120300
• [学会発表] 酵母シグナルペプチドライブラリーを用いたシグナルペプチド最適化ツールの開発 (2012)
  • 著者名/発表者名: 原翔一、菅原知宏、佐原健彦1、扇谷悟1、河原崎泰昌2、兒島孝明、中野秀雄
  • 学会等名: 日本農芸化学会2012年度大会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 20120300
• [学会発表] 組換え出芽酵母高密度懸濁液による難生産性ラッカーゼの効率的生産 (2012)
  • 著者名/発表者名: 齋藤雄太、木全浩一、山口真也、山根恒夫、矢野明、伊藤圭祐、河原崎泰昌
  • 学会等名: 日本農芸化学会2012年度大会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 20120300
• [学会発表] High cell-density expression system : A novel method for extracellular production of "difficult-to-express" proteins (2012)
  • 著者名/発表者名: Kimata K., Yamaguchi M., Saito Y., Yamane T., Nakagawa Y., Yano A., Ito K., Kawarasaki Y
  • 学会等名: The 23rd Annual Meeting of the Thai Society of Biotechnology Systems Biotechnology
  • 発表場所: Bangkok, Thailand
  • 年月日: 20120201-02
• [学会発表] 寿命延伸物質ラパマイシンの標的結合活性を技対するペプチド断片の大規模探索 (2011)
  • 著者名/発表者名: 大石章司、杉本佳乃子、伊藤圭介、河原崎泰昌
  • 学会等名: 第12回静岡ライフサイエンスシンポジウム
  • 発表場所: 静岡
  • 年月日: 20110300
• [学会発表] Novel quantitative yeast two-hybrid system : a key technique for discovering peptide-based drugs (2010)
  • 著者名/発表者名: Sugimoto K., Ojima T., Kamiya T., Nakano H., Ito K., and Kawarasaki Y
  • 学会等名: Pacifichem 2010
  • 発表場所: Waikiki, Hawaii, USA
  • 年月日: 20101200
• [学会発表] ヒトMad2高結合型ペプチドの創製と機能解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 杉本佳乃子、小島晃代、神谷拓摩、中野秀雄、河原崎泰昌
  • 学会等名: 日本農芸化学会2010年度大会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20100300
• [学会発表] Quantitative Y2H screening : Cloning and signal peptide engineering of a fungal secretory LacA gene and its application to yeast two-hybrid system as a quantitative reporter (2010)
  • 著者名/発表者名: Kawarasaki Y., Kamiya T., Sugimoto K., and Ito K
  • 学会等名: The 3rd International Conference on Health and Longevity Sciences
  • 発表場所: University of Shizuoka, Shizuoka, Japan
  • 年月日: 2010-10-16
• [学会発表] 相互作用ドメイン過剰発現による出芽酵母オートファジーの阻害機構の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 神谷拓摩、池内暁紀、山根恒夫、中野秀雄、河原崎泰昌
  • 学会等名: 日本生物工学会2009年度大会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 20090900
• [学会発表] 新規な定量的高速スクリーニング法を用いたヒトMad2蛋白質結合ペプチドの創成 (2009)
  • 著者名/発表者名: 杉本佳乃子、神谷拓摩、小島晃代、中野秀雄、河原崎泰昌
  • 学会等名: 日本生物工学会2009年度大会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 20090900
• [学会発表] エマルジョン培養法による分泌酵素産生菌の選択的濃縮 (2009)
  • 著者名/発表者名: 長尾伸人、安東大介、小島晃代、河原崎泰昌、兒島孝明、中野秀雄
  • 学会等名: 日本生物工学会2009年度大会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 20090900
• [学会発表] Toward reverse interactome analysis : Interaction targeting based on interaction domain overexpression (2009)
  • 著者名/発表者名: Kawarasaki Y
  • 学会等名: The 2nd International Conference on Health and Longevity Sciences
  • 発表場所: University of Shizuoka, Shizuoka, Japan
  • 年月日: 2009-10-01
• [備考] 研究成果の一部は、研究室ホームページに記載、解説し、広く一般への公開に努めている
  • URL: http://sfns.u-shizuoka-ken.ac.jp/geneng/index.html