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本研究の目的であるSUFマシナリーの多成分複合体によるFe-Sクラスター合成機構および機能調節機構の解明に向けて、平成21年度は以下の項目を実施した。
1. 多成分複合体(SufC-SufD複合体)のX線結晶構造解析と機能解析
大腸菌に由来するSufC-SufD複合体の結晶構造の決定に成功した。この構造に基づき複合体中のSufCに様々な変異を導入して、構造変化の有無をクロスリンク法により調べたところ、この複合体中のSufCはATP依存的にダイマーを形成することがわかった。このダイマー形成により、SufC-SufD複合体には大きな構造変化が起きることが強く示唆された。
2. 多成分複合体(SufB-SufC-SufD複合体)の機能解析
酸素を遮断した条件において、SufB-SufC-SufD複合体と鉄・硫黄原子を混合することで、SufB-SufC-SufD複合体上に形成される一過的な鉄硫黄クラスターを実験的に捉えた。
3. IscS-IscU複合体の同定
ISCマシナリーの中核成分であるIscSおよびIscUを大腸菌内で共発現させ、これらの二成分が複合体を形成することを明らかにし、相互作用様式について推定した。
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