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2009 年度 実績報告書

殺虫剤抵抗性を回避する共力剤開発に向けての昆虫シトクロムP450の基礎研究

研究課題

研究課題/領域番号 21780053
研究機関国立感染症研究所

研究代表者

葛西 真治  国立感染症研究所, 昆虫医科学部, 主任研究官 (80332360)

キーワードシトクロムP450 / ピレスロイド / 殺虫剤抵抗性 / 局所施用 / 共力剤 / ネッタイイエカ / ウエストナイル / 解毒酵素
研究概要

ネッタイイエカはウエストナイル熱やフィラリア症といった感染症の主要な媒介蚊である。私たちは2009年にシンガポールで採集したネッタイイエカ(CqSP系)を材料として抵抗性機構の解明を進めた。CqSP系の成虫は採集時すでに58倍の抵抗性を獲得していた。過去の研究で私たちは幼虫の抵抗性にはシトクロムP450であるCYP9M10が関わっていることを明らかにしているが、この酵素はCqSP系成虫の抵抗性には関与していなかった。成虫の抵抗性には幼虫と異なる機構が働いていると考えられた。そこでまず、CqSPの抵抗性レベルをさらに上げて研究に適した系統にするため、permethrinによる室内淘汰を行った。淘汰は成虫胸部背面への局所施用法により行い、各世代約1000匹を処理した。淘汰は雄269ng、雌700ngから始め、5世代行った。淘汰を重ねるに従ってCqSP系統の抵抗性レベルは上昇し、雌成虫のLD50値は採集時401ngであったのが、4世代淘汰後に2158ngに達した。これに伴い抵抗性比も313倍へと上昇した。次に、抵抗性へのシトクロムP450酸化酵素の関与を調べるために、成虫のin vitro代謝試験を行った。雌成虫より調製したミクロゾームタンパクをリン酸バッファー中で^<14>C-permethrinや補酵素NADPHとともにインキュベートし、エーテル抽出した代謝物を薄層クロマトグラフィーによって解析した。その結果、ネッタイイエカ成虫体内ではpermethrinを4'HO-permethrinに解毒していることが明らかになった。今後はこの水酸化を担っているP450分子種の同定を進める予定である。

  • 研究成果

    (6件)

すべて 2010 2009 その他

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件) 学会発表 (2件) 図書 (1件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] Overexpression of cytochrome P450 genes in pyrethroid resistant Culexquinquefasciatus.2010

    • 著者名/発表者名
      Osamu Komagata, Shinji Kasai, Takashi Tomita
    • 雑誌名

      Insect Biochemistry and Molecular Biology 40

      ページ: 146-152

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Alternative splicing and developmental regulation of glutathione transfe-rases in Culex quinquefasciatus Say.2009

    • 著者名/発表者名
      Shinji Kasai, Osamu Komagata, Yoshika Okamura, Takashi Tomita
    • 雑誌名

      Pesticide Biochemistry and Physiology 94

      ページ: 21-29

    • 査読あり
  • [学会発表] ネッタイシマカ成虫のピレスロイド剤抵抗性機構(1)2010

    • 著者名/発表者名
      葛西真治, 駒形修, 糸川健太郎, 小林睦生, 冨田隆史
    • 学会等名
      第62回日本衛生動物学会大会
    • 発表場所
      鹿児島大学
    • 年月日
      2010-04-03
  • [学会発表] ネッタイイエカ成虫のピレスロイド剤抵抗性機構(1)2010

    • 著者名/発表者名
      葛西真治、駒形修、糸川健太郎、小林睦生、冨田隆史
    • 学会等名
      第54回日本応用動物昆虫学会
    • 発表場所
      千葉大学
    • 年月日
      2010-03-27
  • [図書] Advances in Human Vector Control2009

    • 著者名/発表者名
      Osamu Komagata, Shinji Kasai, Takashi Tomita
    • 総ページ数
      241
    • 出版者
      Insecticide resistance in the mosquito Culex pipiens complex : concerns about development of pyrethroid ressistance.
  • [備考]

    • URL

      http://www.nih.go.jp/niid/entomology/

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公開日: 2011-06-16   更新日: 2016-04-21  

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