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2010 年度 実績報告書

ATMT法による深在性真菌症治療薬ミカファンギンの生合成機構の解明

研究課題

研究課題/領域番号 21780079
研究機関富山県立大学

研究代表者

山田 雅人  富山県立大学, 工学部, 助教 (40448692)

キーワードミカファンギン / FR901379 / Coleophoma empetri / ATMT / NRPS / 変異解析 / スクリーニング / 抗生物質
研究概要

深在性真菌症治療薬ミカファンギンの原体であるFR901379は構造特徴からnonribosomal peptide synthetase (NRPS)によって生合成されていると考えられるが、その生合成遺伝子や生合成経路は不明である。これまでに、Agrobacterium tumefaciens mediated transformation (ATMT)法を用いてFR901379を生産する糸状菌Coleophoma empetri F-11899のT-DNA挿入変異株ライブラリーを作成し、抗菌活性を指標としたスクリーニングによってFR901379非生産株を単離した。これら変異株のT-DNA挿入近傍領域をTAIL-PCR法とプラスミドレスキュー法により単離し配列を解析した。一方で、次世代シーケンサーによるC.empetri F-11899のゲノム配列を解析し、T-DNA挿入近傍領域と比較した。得られたcontig配列上の遺伝子をアノテーションした結果、FR901379生合成に関わると推定される遺伝子群を見いだした。これら推定される遺伝子群がFR901379生合成経路にどの様に関連するのか、それら遺伝子の遺伝子破壊による証明と機能解析のための組換え発現を試みている。本研究によりFR901379生合成遺伝子とその生合成機構が解明されれば、修飾酵素を利用した物質構造の改変が可能となり、新規の生理活性物質の創出が期待される。

  • 研究成果

    (2件)

すべて 2011 2010

すべて 学会発表 (2件)

  • [学会発表] 糸状菌Coleophoma empetri F-11899における異種発現のためのgpdプロモーターの単離2011

    • 著者名/発表者名
      浅井 剛久、山田 雅人、上田 聡、磯貝 泰弘、橋本 正治
    • 学会等名
      2011年度(平成23年度)日本農芸化学会
    • 発表場所
      京都女子大学(京都)
    • 年月日
      2011-03-27
  • [学会発表] 糸状菌Coleophoma empetri F-11899における異種タンパク質発現用プロモーターの検討2010

    • 著者名/発表者名
      浅井 剛久、山田 雅人、磯貝 泰弘、橋本 正治
    • 学会等名
      2010年度(平成22年度)日本生物工学会
    • 発表場所
      ワールドコンベンションセンターサミット宮崎シーガイア(宮崎)
    • 年月日
      2010-10-29

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公開日: 2012-07-19  

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