| 研究概要 |
腸管出血性大腸菌(EHEC)の病原性に必須なLEE遺伝子群の発現は、様々な外部環境シグナルに応答して厳密に制御されている。染色体上の異なる領域にコードされるパラログPchA, B, Cは種々の環境シグナルにそれぞれ応答することで発現量を変化させ、LEE全体の発現を制御するマスターレギュレータとして機能すると考えられている。昨年度の遺伝学的・生化学的解析から、pchAおよびpchBの転写を活性化するLysR型転写制御因子の一つとして、大腸菌K-12株にも存在するLrhAがLEEの転写発現を制御していることが明らかとなった。今年度はpchAおよびpchB上流の転写調節領域の詳細な欠失解析を行ったところ、LrhAによる転写制御に重要な塩基が明らかとなった。EHEC O157 Sakai株のlrhA欠損株をさらに詳細に解析したところ、野生株と比較してLEEのみならず溶血素であるエンテロヘモリシン(Ehx)の活性が著しく低下していることが明らかとなった。遺伝学的解析から、LrhAによるEhxの発現活性化は転写レベルで行われていることが明らかとなり、LrhAに依存したehxの活性化には、LEEにコードされ、ehxの転写活性化に重要であるGrlAの機能とは非依存的に行われることが明らかとなった。すなわち、LrhAとGrlAは独立にehxの転写活性化に重要であることが明らかとなった。精製蛋白質を用いた生化学的解析から、LrhAはehxオペロンの転写調節領域に結合することが明らかとなった。
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