| 研究概要 |
尋常性天疱瘡(PV)は、表皮細胞間接着分子であるデスモグレイン3(Dsg3)に対する自己抗体により誘導され、全身の皮膚、粘膜にびらん、水疱形成をきたす重篤な自己免疫性疾患である。PVの現在の治療は、副腎皮質ホルモン剤など免疫を非特異的に抑制する治療が中心で副作用が多く,疾患特異的な治療の開発が望まれる。疾患特異的な治療法を開発するには、PVにおける水疱形成機序の解明が重要である。我々は、Dsg3をgreen fluorescent protein (GFP)を用いて可視化した遺伝子組み換えマウス(Dsg3-GFPマウス)を作成した。Dsg3-GFPマウスに抗Dsg3抗体を投与して、水疱形成過程をin vivoでライブ観察することで、水疱形成機序の解明を目指した.抗Dsg3抗体には,当研究室で作成したPVモデルマウスより単離した,抗Dsg3モノクローナル抗体の中で新生児マウス皮膚に対する病原性が最も強いことが確認されているAK23を用いた.昨年度,Dsg1を阻害するexofoliative toxin A(ETA)をAK23に添加し,Dsg3-GFP新生児マウス背部に皮内注すると病理組織学的に水疱形成を来す事ができたが,心拍動のためライブ観察が困難であった.今年度,麻酔条件、観察部位の検討を重ねたが新生児マウスでのライブ観察はできなかった.昨年度は水疱形成を来す条件を得られなかった成体マウス耳でのライブ観察を可能にするため,AK23の作製法を検討してより病原性の強いAK23を作製し,水疱形成までの麻酔条件の改善も重ねた,さらに,成体マウス耳で水疱形成能を持つAK23をAlexa568で標識したものを作製した,Alexa568標識AK23を成体マウス耳に皮内注する事で水疱形成過程におけるDsg3,抗Dsg3抗体の動態をin vivoで二光子顕微鏡により観察することができた.
|
