代謝捕捉の概念に基づくHIF-1活性化低酸素腫瘍の高感度イメージング法の開発

2010 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 21791187
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 上田 真史 京都大学, 医学研究科, 助教 (40381967)
• キーワード: 放射性医薬品 / 分子イメージング / 低酸素 / HIF-1 / 代謝捕捉

研究概要

本応募課題では、腫瘍の悪性化、治療抵抗性に関与する低酸素誘導因子(HIF-1)の存在する腫瘍を高感度にイメージングする手法の開発を目的としている。これを達成するため、HIF-1の酸素依存的分解に関与するアミノ酸配列(ODD)をプローブの母体に選択し、膜透過配列(PTD)と1型単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼ(HSV-1 TK)を結合させた融合タンパク質(PTD-ODD-HSV-1 TK:POTK)を構築し、それによってリン酸化されて細胞内に蓄積する基質プローブを利用することで、代謝捕捉の概念に基づくHIF-1活性化低酸素腫瘍の高感度イメージング法の開発を計画した。
昨年度の成果として、低酸素環境下で選択的に存在して基質プローブを代謝捕捉する融合タンパク質POTKの構築に成功した。そこで今年度はインビボでの検討を行った。まず、蛍光色素で標識したPOTKを担がんマウスに投与し、その動態を光イメージング装置で経時的に撮像したところ、腫瘍移植反対側の筋肉に比べて腫瘍の蛍光強度は2倍以上高い値を示し、POTKの腫瘍集積性が確認できた。次にPOTKを担がんマウスに投与し、3時間後にそれによって代謝捕捉される[^<125>I]FIAUを投与したところ、腫瘍に集積した放射能は非投与群の3倍以上増加し、腫瘍血液比および腫瘍筋肉比はそれぞれ1.3倍および1.6倍向上した。さらに、POTKを前投与した担がんマウスに[^<123>I]FIAUを投与し、6時間後に平面画像を収集したところ、腫瘍が描出された一方移植対側肢への放射能集積は認められなかった。また、腫瘍に集積した放射能は、代謝捕捉の概念を利用していない既存プローブであるPOSを用いた場合よりも高く、POTKと[^<123>I]FIAUを用いることでHIF-1活性化低酸素腫瘍の高感度イメージングの可能性が示された。

研究成果

• [雑誌論文] PET Imaging of Hypoxia-Inducible Factor-1-Active Tumor Cells with Pretargeted Oxygen-Dependent Degradable Streptavidin and a Novel ^<18>F-Labeled Biotin Derivative (2011)
  • 著者名/発表者名: Kudo T, Ueda M, Konishi H, Kawashima H, Kuge Y, Mukai T, Miyano A, Tanaka S, Kizaka-Kondoh S, Hiraoka M, Saji H
  • 雑誌名: Mol Imaging Biol 巻: (印刷中)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Rapid detection of hypoxia-inducible factor-1-active tumours : pretargeted imaging with a protein degrading in a mechanism similar to hypoxia-inducible factor-1alpha (2010)
  • 著者名/発表者名: Ueda M, Kudo T, Kuge Y, Mukai T, Tanaka S, Konishi H, Miyano A, Ono M, Kizaka-Kondoh S, Hiraoka M, Saji H
  • 雑誌名: Eur J Nucl Med Mol Imaging 巻: 37 ページ: 1566-74
  • 査読あり
• [学会発表] HIF-1存在低酸素腫瘍イメージングのためのRI/蛍光デュアル標識タンパク質プローブの開発 (2011)
  • 著者名/発表者名: 上田真史、宮野梓、工藤喬、小川京、小野正博、近藤科江、佐治英郎
  • 学会等名: 第8回がんとハイポキシア研究会
  • 発表場所: 北海道大学、札幌
  • 年月日: 2011-01-30
• [学会発表] 高精度核医学分子イメージングのための放射性プローブの体内動態の化学制御法の開発 : 腫瘍低酸素領域のプレターゲットPETイメージング法 (2010)
  • 著者名/発表者名: 上田真史、工藤喬、小西宏明、小川京、河嶋秀和、小野正博、向高弘、久下裕司、近藤科江、平岡眞寛、佐治英郎
  • 学会等名: 第60回日本薬学会近畿支部総会・大会
  • 発表場所: 摂南大学、枚方
  • 年月日: 2010-10-30
• [学会発表] Pretargeted PET imaging of hypoxia-inducible factor-1-active tumors with an oxygen-dependent degradable streptavidin and a ^<18>F-labeled biotin derivative (2010)
  • 著者名/発表者名: Ueda M, Kudo T, Konishi H, Kawashima H, Kuge Y, Mukai T, Ono M, Kizaka-Kondoh S, Hiraoka M, Saji H
  • 学会等名: 2010 World Molecular Imaging Congress
  • 発表場所: Kyoto, Japan
  • 年月日: 2010-09-08
• [学会発表] Tumor pretargeting in mice using an oxygen-dependent degradable streptavidin and a radioiodinated biotin : comparison between autoradiography and hypoxia-inducible factor-1α-immunohistochemistry (2010)
  • 著者名/発表者名: Ueda M, Kudo T, Kuge Y, Mukai T, Miyano A, Ono M, Kizaka-Kondoh S, Hiraoka M, Saji H
  • 学会等名: 2010 Society of Nuclear Medicine Annual Meeting
  • 発表場所: Salt Lake City, USA.
  • 年月日: 2010-06-06
• [備考]
  • URL: http://www.pharm.kyoto-u.ac.jp/byotai/