| 研究概要 |
【背景と目的】ERは他の核内受容体と相互作用があり転写活性が修飾される.ERを介するエストロゲン(E2)作用に対するSXRの関与を解析した.また臨床検体を用いてSXRの発現の有無とER発現や病理学的因子との関連を解析し、臨床的意義を検討した。【方法と結果】エストロゲン応答配列(ERE)及びSXRをMCF-7乳癌細胞に遺伝子導入しレポーターアッセイを行うと,E2による転写活性はSXRにより用量依存性に増強された.このSXRによるEREを介した転写活性の増強の機序を解析した.Mammalian two hybrid assay(MTH)、Electropholetic mobility shift assay(EMSA)を用いてSXRはin vitroではERやEREとは直接結合しないことを確認した。そこでSXRが転写共役因子とERの結合を変化させる可能性を考え、MTH, GST-pull down assay、immunoprecipitation、そして新たに開発した放射性同位元素なしにEMSAと同様に核酸と蛋白の結合を確認できる実験系を用いて検討した。SXRによりERとコアクチベーターp-CIPとの結合は増加しないことを確認した。一方コリプレッサーsilencing mediator for retinoid and thyroid receptors(SMRT)を検討すると、ERとSMRTの結合がSXRの用量依存的に解離した。乳癌手術検体を用いて、SXRのmRNA定量を行ったところ、SXR発現はER発現と正の相関があることがわかった。【まとめ】以上より,SXRとSMRTが結合しERからSMRTが解離することによりERの転写が増強されたと考えられた.したがって,SXRの発現そのものがエストロゲン作用増強をきたすと推測される.また,ER陽性乳癌細胞でSXR発現が多いことより、乳癌細胞におけるSXR発現の有無がER陽性乳癌治療法の選択及び治療効果の推測に有用である可能性が示唆された.
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