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1.HER2陽性乳癌患者の手術後に、トラスツズマブ投与前として末梢血を約30-50mlの採血を実施した。またトラスツズマブ投与(1年間、三週毎)中、投与後にもそれぞれ30-50ml程度採血を順次実施している。採取した血液は末梢血単核球(PBMC)に精製し、匿名化及びコード化した状態で保存している。
2.保存したPBMCはマイクロビーズを用いてCD8+T細胞に精製し、HER2ペプチド存在下に培養することで、HER2特異的CD8+T細胞の誘導を試みた。コントロールとしてCMV、EBNAペプチドを用いている。
3.HER2特異的CD8+T細胞の解析:2)で誘導されたCD8+T細胞を用いて、ELISPO TassayにてHER2特異的IFNγ産生性CD8+T細胞の存在を解析した。健常人と比較した場合、HER2陽性乳癌患者においてHER2特異的CD8+T細胞の存在が術後一年後においても確認できた症例が存在する。HLA-A0201を有する症例の場合、HER2テトラマーが有用であるため、ELISPOT assayとともにフローサイトメトリーにて解析中である。
4.さらなる症例集積のため、HER2陽性乳癌患者を対象とした多施設共同の臨床試験「HER2陽性乳がんに対する術前トラスツズマブ療法における効果予測マーカーの探索的研究(研究代表者:向井博文氏、国立がん研究センター東病院)」に参加し、三重大学医学部附属病院に限定し、付随研究の一環として当該研究を継続することを申請している。倫理委員会の承認後、開始予定である。
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