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近年、ヒト悪性黒色腫の前癌病変やトランスジェニック動物の前癌病変においてセネセンスと呼ばれる細胞の分裂停止が報告されている。膵癌の前癌病変であるIPMN や PanIN においてもセネセンスが誘導されていることが想定されるため、本研究では、膵前癌病変におけるセネセンスの有無と関連する遺伝子群の発現変化を解明し、膵癌の早期診断や個別化治療への臨床応用を模索する。
平成21年度までに膵癌および前癌病変の凍結切片を用いて、セネセンスマーカー発現の解析を行った(研究目的1)。セネセンス関連βガラクトシダーゼ活性やセネセンス関連ヘテロクロマチン凝集、p15、p16などのセネセンスマーカーの発現は、IPMAからIPMB、non-invasive IPMC、invasive IPMCへと至る膵発癌経路において有意な逆相関をもって発現が減弱することを確認した。この結果は、膵発癌過程において、悪性化に伴いセネセンスによる細胞の分裂停止が損なわれることを示しており、現在投稿中である。
平成22年度は、FFPEサンプルやマイクロダイセクションサンプルから抽出したRNAサンプルを用いて、セネセンス関連mRNA や microRNAの発現解析を進めた(研究目的2)。この手法は定量的である上に感度が高く、発癌過程においてセネセンスが損なわれるメカニズムの解析に有用であった。従って、細胞診サンプルなどの臨床サンプルへの応用が極めて有用であり、膵液や膵穿刺吸引細胞診サンプルなどにおいてこれらのセネセンスマーカー発現を解析できれば、術前に詳細な悪性度の診断が可能であり、手術や化学療法、経過観察の適応を判断するのに極めて有効である。我々は、膵穿刺吸引細胞診サンプルからマイクロダイセクション法により採取した細胞における標的mRNA発現解析の手法も確立した。(研究目的3;Neoplasia誌、Int J Oncol誌)
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