| 研究概要 |
近年、CRH関連ペプチドとして、urocortin1 (Ucn1), stresscopin (SCP)/urocortin3 (Ucn3), stresscopin-related peptide (SRP)/urocortin 2 (Ucn2)が発見され、CRHR1およびCRHR2という2種類の受容体にそれぞれ異なる結合能(CRHとUcn1は、CRHR1,CRHR2の両方に結合し得るが、SCPとSRPは、CRHR2のみに結合する。)で結合し、CRHと同様に生体のストレス反応に関与することが解明されつつある。本検討はすべて、神戸大学大学院医学系研究学科医学倫理委員会の承認のもと、インフォームドコンセントの後に施行した。初期の子宮癌手術で摘出されたヒト正常卵巣および不妊治療患者(男性因子と卵管因子)の卵胞液から分離培養したヒト黄体化顆粒膜細胞におけるSCP/Ucn3およびCRHR2のmRNAレベルでの存在を、RT-PCRで検討した。ヒト正常卵巣ならびにヒト黄体化顆粒膜細胞では、CRH,Ucn1,SCP,SRPのmRNA発現を認めた。また、それら受容体であるCRHR1,CRHR2のmRNA発現を認めた。CRHR1ならびにCRHR2の培養ヒト黄体化顆粒膜細胞における局在は免疫染色法で存在を確認した。とくに、CRHR2の機能解析のため、Ucn1とSCPに着目した。培養ヒト黄体化顆粒膜細胞において、Ucn1とSCPのタンパク発現を免疫染色胞で検討したが、Ucn1のタンパク発現は抗体が悪いためか不明瞭であったが、SCPタンパク発現は存在を認めた。SCP/Ucn3の培養ヒト黄体化顆粒膜細胞のプロゲステロン産生に与える影響を検討するため、SCP/Ucn3添加前後の培養液中プロゲステロン値の変化をELISA法で測定した。SCP/Ucn3添加により培養ヒト黄体化顆粒膜細胞でのプロゲステロン産生を抑制した。
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