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近年の分子生物学的研究により卵巣癌発生のメカニズムが解明されつつあるが、その多くは依然として不明である。今後、卵巣癌の治療成績を向上させるためには卵巣癌の分子生物学的特徴を解明し、その特徴にターゲットを絞った創薬が必要と考えられる。NAC-1を標的とした治療法確立のための基礎的検討を行った。NAC-1に対するSi-RNAやNAC-1のドミナントネガティブタンパクを用いた阻害実験を行った。免疫沈降法、ウェスタンブロット法を用いてNAC-1タンパクの結合領域の検討及び、機能解析を行った。NAC-1のSi-RNAを用いた阻害実験ではNAC-1が高発現しているSKOV3、Hela細胞で細胞死が誘導された。次にNAC-1のタンパクレベルでの機能について検討した。免疫沈降法を用いてNAC-1タンパクはホモダイマーを形成し機能している事を発見した。NAC-1タンパクのDeletion mutantを作成し免疫沈降法を用いるとN-teminal領域にてNAC-1はホモダイマーを形成している事が明らかとなった。NAC-1が高発現しているSKOV3、Hela細胞にN-teminal領域のSmall deletion mutantを遺伝子導入し発現させ、蛍光染色するとNAC-1の形態が点状からヌードル状に変化した。すなわち、N-terminal領域のDeletion mutantはドミナントネガティブタンパクとなり得る事が示唆された。そこで我々はN-terminal領域のDeletion mutantがトネガティブタンパクの機能を持つか否かについてTet-off system(テトラサイクリン誘導ベクター:倍地中のテトラサイクリン濃度を変える事により遺伝子発現を調節できる)を用いてDeletion mutantの発現調節を行った。この結果、Deletion mutantを発現させるとSKOV3、Hela細胞にはいずれも細胞死が誘導された。このTet-off systemを導入したSKOV3、Hela細胞をヌードマウスに移植し腫瘍生成後、ドミナントネガティブタンパクを発現させると、腫瘍は縮小した。NAC-1のN末結合領域に作用し、BTB結合を抑制するsmall compoundあるいは、peptideの合成が、卵巣癌に対する新規分子標的治療になる事が示唆された。
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