| 研究概要 |
妊婦のインフルエンザ感染は様々なリスクファクターとなりうるため、胎盤におけるインフルエンザウイルスの感染機構の解析を目的とした。ヒト絨毛癌細胞株BeWo、あるいは不死化ヒト初期絨毛株HTR8, Swan71にA/Udorn/72インフルエンザウイルス(H3N2)を感染させた。抗インフルエンザ蛍光抗体で免疫染色したところ感染8時間後から細胞質内にウイルスタンパクが検出され、インフルエンザウイルスの絨毛細胞への感染が確認された。さらに培養上清中にHA活性を認めた。また、核の断片化とDNA ladder形成より感染細胞のアポトーシスを認めた。この結果から、絨毛細胞はインフルエンザウイルスに感受性があり、妊娠中にインフルエンザウイルスに感染すると、胎盤が直接傷害され,低酸素状態や代謝障害によって胎児の発育に影響を及ぼす可能性が示唆された。(Am J Reprod Immunol.2009)
2009年4月にブタ由来の新型インフルエンザ(パンデミックインフルエンザH1N1)が発生した。
パンデミックインフルエンザH1N1を用いた検討を行うため、施設内の倫理委員会、バイオセーフティー委員会の承認を得てインフルエンザ患者からのウイルス分離を行った。日本大学医学部付属板橋病院の総合内科を受診し簡易検査でA型インフルエンザウイルス抗原陽性の患者からインフォームドコンセントを得て、鼻咽頭拭い液を採取した。BSL3実験室にて、鼻咽頭拭い液をMDCK細胞に加えウイルスを感染・増殖させた後に回収した。回収したウイルスからRNAを抽出しPCRにてHAのバンドを確認した。さらにHAのシークエンスを行い分離したウイルスがA Narita 2009(H1N1)のHA配列と一致することを確認した。現在、この臨床分離株インフルエンザウイルス(H1N1)を用いて、trophoblastへの感染実験を行っている。
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