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シスプラチン耐性および感受性卵巣癌を用い、シスプラチンにより活性化される血管新生反応をトポテカンが抑制するメカニズムを比較検討する。さらに、シスプラチンで活性化されトポテカンで抑制される転写因子に着目し、そのターゲットとなるプロモーターをマイクロアレイで解析し、標的遺伝子を解明する。この標的遺伝子がシスプラチンの耐性化に関与しているかどうかはin vitroとin vivoにより再確認する。以上の検討によりトポテカンの白金製剤により引き起こされる血管新生反応への影響を解明することが本研究の目的である。
トポテカンのAkt/ERK両経路への影響およびIn vivoにおけるトポテカンの薬剤感受性に対する効果の検討
シスプラチン耐性ヒト卵巣癌細胞株にシスプラチンを添加すると、Aktがリン酸化しさらにトポテカンによりリン酸化が抑制されることをWestern Blotting法等を用いて確認したことにより、トポテカンがシスプラチンの耐性解除に働いていることを解明した。さらにヌードマウスにシスプラチン耐性卵巣癌細胞株を注入し卵巣癌モデルを作成した上でシスプラチンおよびトポテカンの抗腫瘍効果を検討したところトポテカンによりシスプラチンの感受性が再獲得されることがin vitroにおいても確認できた。またこの腫瘍を用いTUNEL法にてアポトーシスを定量化した。さらに耐性卵巣癌細胞にシスプラチンを添加するとHIF-1αが核内に移行しVEGFのプロモーターに結合しその発現が増加することを解明し、トポテカン添加により減少することを解明した、以上よりトポテカンによる薬剤感受性の再獲得のメカニズムを総合的に解明した。上記の内容を論文に報告した(Cancer Biol Ther. 2010 Dec 1;10(11):1137-46.)。
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