蝸牛線維細胞を標的としたBrn-4欠損マウスへの骨髄間葉系幹細胞移植

2010 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 21791646
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 耳鼻咽喉科学
• 研究機関: 順天堂大学
• 研究代表者: 神谷 和作 順天堂大学, 医学部, 講師 (10374159)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2010
• キーワード: 内耳 / 再生医療 / 遺伝性難聴 / 骨髄間葉系幹細胞

研究概要

本研究では遺伝性難聴の新規細胞治療法の開発を目的として骨髄間葉系幹細胞の内耳への最適移植法を検討した。移植用幹細胞としてはC57BL/6マウス由来H1/A骨髄間葉系幹細胞(MSC)株にEGFP(緑色蛍光)またはHcRed(遠赤色蛍光)遺伝子を安定的に強度発現する細胞株を樹立した。同細胞をマウスへの経半規管外リンパ液還流法により内耳への移植を行った。移植手術前に蝸牛線維細胞に選択的障害を与える薬剤3-nitoropropionic acid (3NP)により移植前に軽微な炎症を惹起したところ、細胞導入効率が大幅に上昇した。更にこの誘導機構の解析により、ケモカインMCP1とその受容体CCR2による誘導機序が示されたため、CCR2遺伝子を内耳より単離し発現用プラスミドを構築した。これを移植細胞に導入したところ、細胞生着効率が飛躍的に向上した。これらの条件検討を推進することにより新規細胞治療法がBrn-4変異等による遺伝性難聴に対する更に効果の高い治療法として聴力改善につながると考えられる。

研究成果

• [雑誌論文] (2011)
  • 著者名/発表者名: Hayashi C, Funayama M, Li Y, Kamiya K, Kawano A, Suzuki M, Hattori N, Ikeda K.
  • 雑誌名: Int J Pediatr Otorhinolaryngol 75(2) ページ: 211-214
  • 査読あり
• [雑誌論文] Analysis of subcellular localization of Myo7a, Pcdh15 and Sans in Ush1c knockout mice. (2011)
  • 著者名/発表者名: Yan D, Kamiya K, Ouyang XM, Liu XZ.
  • 雑誌名: Int J Exp Pathol. 92(1) ページ: 66-71
  • 査読あり
• [雑誌論文] 実験動物を用いた内耳細胞治療研究へのアプローチ (2010)
  • 著者名/発表者名: 神谷和作
  • 雑誌名: 耳鼻咽喉科臨床 補126 ページ: 1-5
• [雑誌論文] Vestibular function of patients with profound deafness related to GJB2 mutation. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kasai M, Hayashi C, Iizuka T, Inoshita A, Kamiya K, Okada H, Nakajima Y, Kaga K, Ikeda K.
  • 雑誌名: Acta Otolaryngol. 130(9) ページ: 990-995
  • 査読あり
• [雑誌論文] Enhanced expression of C/EBP homologous protein (CHOP) precedes degeneration of fibrocytes in the lateral wall after acute cochlear mitochondrial dysfunction induced by 3-nitropropionic acid. (2010)
  • 著者名/発表者名: Fujinami Y, Mutai H, Kamiya K, Mizutari K, Fujii M, Matsunaga T.
  • 雑誌名: Neurochem Int. 56(3) ページ: 487-494
  • 査読あり
• [雑誌論文] 難聴に対する細胞治療法の開発 (2009)
  • 著者名/発表者名: 神谷和作
  • 雑誌名: 医学のあゆみ 特集号・細胞治療Update Vol229, No.9 ページ: 863-867
• [雑誌論文] Cell therapy targeting cochlear fibrocytes (2009)
  • 著者名/発表者名: Kamiya K
  • 雑誌名: Otology Japan 19(3) ページ: 214-218
• [雑誌論文] Cochlear outer hair cells in a dominant-negative connexin26 mutant mouse preserve non-linear capacitance in spite of impaired distortion product otoacoustic emission (2009)
  • 著者名/発表者名: Minekawa A, Abe T, Inoshita A, Iizuka T, Kakehata S, Narui Y, Koike T, Kamiya K, Okamura HO, Shinkawa H, Ikeda K
  • 雑誌名: Neuroscience. 164(3) ページ: 1312-1319
  • 査読あり
• [学会発表] Cochlear Gap-Junction plaque is disrupted by dominant-negative Connexin26 mutation. (2010)
  • 著者名/発表者名: 神谷和作
  • 学会等名: 欧州分子生物学会(EMBO meeting)
  • 発表場所: スペイン・バルセロナ
  • 年月日: 2010-09-04
• [学会発表] コネキシン26優性阻害変異によるコルチ器周囲細胞におけるギャップ結合プラークの形成変化 (2009)
  • 著者名/発表者名: 神谷和作、池田勝久
  • 学会等名: 日本耳科学会学術集会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20091000
• [備考] ホームページ等