動物由来の生細胞内におけるタンパク質間相互作用の定量的解析

2010 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 21850027
• 研究種目: 研究活動スタート支援
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 生体関連化学
• 研究機関: 甲南大学
• 研究代表者: 臼井 健二 甲南大学, フロンティアサイエンス学部, 講師 (70543792)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2010
• キーワード: タンパク質 / 発現制御 / 細胞アレイ / ナノバイオ / タンパク質の自己相互作用 / ペプチド核酸(PNA) / 核酸の四重鎖構造 / アミロイド

研究概要

相互作用に関与する2種のタンパク質の発現量を、ペプチド核酸導入ペプチドを用いることにより自在に変化させることで、動物由来の生細胞内でのタンパク質同士の相互作用を詳細かつ定量的に解析できる系の構築を目指した。具体的には、新規タンパク質発現制御システムの構築、自己相互作用をモデルにした細胞内外における相互作用検出系の構築、高効率解析を実現するための細胞アレイの構築の三点の基盤的事項の確立に成功した。

研究成果

• [雑誌論文] Thermodynamic stability of Hoogsteen and Watson-Crick base pairs in the presence of histone H3-mimicking peptide (2011)
  • 著者名/発表者名: S.Pramanik, K.Nakamura, K.Usui, S.Nakano, S.Saxena, J.Matsui, D.Miyoshi, N.Sugimoto
  • 雑誌名: Chem.Commun. 47 ページ: 2790-2792
  • 査読あり
• [雑誌論文] Nanomolar aggregation of amyloid-beta peptides covalently and site-specifically modified by cholesterol oxidation products (2010)
  • 著者名/発表者名: K.Usui, J.D.Hulleman, J.F.Paulsson, S.J.Siegel, E.T.Powers, J.W.Kelly
  • 雑誌名: Peptides, 2008 2008 ページ: 588-599
  • 査読あり
• [雑誌論文] Construction of detection system for Amyloid beta peptide localization and aggregation using fluorescent and luminescent fusion proteins (2010)
  • 著者名/発表者名: K.Usui, M.Mie, T.Andou, N.Sugimoto, H.Mihara, E.Kobatake
  • 雑誌名: Peptide Science 2009 (K.Okamoto, Ed.) 2009 ページ: 111-112
  • 査読あり
• [雑誌論文] Fluorescent and luminescent fusion proteins for detection of Amyloid beta peptide localization and aggregation (2010)
  • 著者名/発表者名: K.Usui, M.Mie, T.Andou, N.Sugimoto, H.Mihara, E.Kobatake
  • 雑誌名: Peptides 2010 2010 ページ: 488-489
  • 査読あり
• [雑誌論文] PNA-peptide conjugates for regulation of DNA and RNA G-quadruplex structures depending on a particular protease concentration (2010)
  • 著者名/発表者名: K.Usui, K.Kobayashi, N.Sugimoto
  • 雑誌名: Peptides 2010 2010 ページ: 608-609
  • 査読あり
• [雑誌論文] Protein-protein interactions and selection : array-based techniques for screening disease-associated biomarkers in predictive/early diagnosis (2010)
  • 著者名/発表者名: K.-Y. Tomizaki, K.Usui, H.Mihara
  • 雑誌名: FEBS J. 277 ページ: 1996-2005
  • 査読あり
• [雑誌論文] A designed peptide chip : protein fingerprinting technology with a dry peptide array and statistical data mining (2009)
  • 著者名/発表者名: K.Usui, K.-Y. Tomizaki, H.Mihara
  • 雑誌名: Methods.Mol.Biol. 570 ページ: 273-284
  • 査読あり
• [雑誌論文] Site-specific modification of Alzheimer's peptides by cholesterol oxidation products enhances aggregation energetics and neurotoxicity (2009)
  • 著者名/発表者名: K.Usui, J.D.Hulleman, J.F.Paulsson, S.J.Siegel, E.T.Powers, J.W.Kelly
  • 雑誌名: Proc.Natl.Acad.Sci.USA 106 ページ: 18563-18568
  • 査読あり
• [学会発表] 蛍光標識ペプチドとジチオカルバメート鉄錯体による新規NOセンサーの構築 (2011)
  • 著者名/発表者名: 宮崎洋、臼井健二、藤井敏司
  • 学会等名: 日本化学会第91春季年会
  • 発表場所: 神奈川県横浜市
  • 年月日: 20110326-20110329
• [学会発表] PNA含有ペプチドを用いてDNA四重鎖構造を特定プロテアーゼの有無によって制御する (2011)
  • 著者名/発表者名: 臼井健二、小林慶太、杉本直己
  • 学会等名: 第13回生命化学研究会シンポジウム
  • 発表場所: 宮城県仙台市
  • 年月日: 2011-01-07
• [学会発表] Nanomolar aggregation and neurotoxicity of Amyloid beta peptides with site-specific modification of oxidized cholesterol (2010)
  • 著者名/発表者名: K.Usui, E.T.Powers, J.F.Paulsson\, S.J.Siegel, J.W.Kelly
  • 学会等名: 5th International Peptide Symposium
  • 発表場所: Kyoto, Japan
  • 年月日: 20101204-20101209
• [学会発表] Designed peptide libraries for protein and cell analyses (2010)
  • 著者名/発表者名: T.Kikuchi, K.Usui, T.Takahashi, H.Mihara
  • 学会等名: 5th International Peptide Symposium
  • 発表場所: Kyoto, Japan
  • 年月日: 20101204-20101209
• [学会発表] 核酸の四重鎖構造を特定のプロテアーゼの有無によって制御できるPNA含有ペプチド (2010)
  • 著者名/発表者名: 臼井健二、小林慶太、杉本直己
  • 学会等名: 第4回バイオ関連化学シンポジウム
  • 発表場所: 大阪府豊中市
  • 年月日: 20100924-20100926
• [学会発表] Enhancement of aggregation energetics and neurotoxicity by site-specific modification of amyloid beta peptides with oxidized cholesterol (2010)
  • 著者名/発表者名: K.Usui, E.T.Powers, J.F.Paulsson, S.J.Siegel, J.W.Kelly
  • 学会等名: 31st European Peptide Symposium
  • 発表場所: Copenhagen, Denmark
  • 年月日: 20100905-20100909
• [学会発表] PNA-peptide conjugates for regulation of DNA and RNA G-quadruplex structures depending on a particular protease concentration (2010)
  • 著者名/発表者名: K.Usui, K.Kobayashi, N.Sugimoto
  • 学会等名: 31st European Peptide Symposium
  • 発表場所: Copenhagen, Denmark
  • 年月日: 20100905-20100909
• [学会発表] Fluorescentand luminescent fusion proteins for detection of Amyloid beta peptide localization and aggregation (2010)
  • 著者名/発表者名: K.Usui, M.Mie, T.Andou, N.Sugimoto, H.Mihara, E.Kobatake
  • 学会等名: 31st European Peptide Symposium
  • 発表場所: Copenhagen, Denmark
  • 年月日: 20100905-20100909
• [学会発表] Data mining of protein fingerprints and cell fingerprints from designed alpha-helical peptide arrays (2010)
  • 著者名/発表者名: 臼井健二
  • 学会等名: 第4回HiPep沖縄国際ワークショップ
  • 発表場所: 沖縄県那覇市
  • 年月日: 20100709-20100711
• [学会発表] αへリックスペプチドの細胞導入活性スクリーニング及び細胞死活性評価 (2010)
  • 著者名/発表者名: 菊池卓哉、臼井健二、高橋剛、三原久和
  • 学会等名: 日本化学会第90春季年会
  • 発表場所: 大阪府東大阪市
  • 年月日: 20100326-20100329
• [学会発表] 核酸四重鎖構造を制御するPNA含有ペプチドの構築 (2010)
  • 著者名/発表者名: 小林慶太、臼井健二、杉本直己
  • 学会等名: 日本化学会第90春季年会
  • 発表場所: 大阪府東大阪市
  • 年月日: 20100326-20100329
• [学会発表] タンパク質解析・細胞解析用ペプチドチップ (2010)
  • 著者名/発表者名: 臼井健二
  • 学会等名: バイオプロセッシング研究会(バイオ単分子研究会)
  • 発表場所: 東京都千代田区
  • 年月日: 2010-03-23
• [学会発表] Screening of peptides with cell penetrating activity against various types of cells from a novel alpha-helical peptide library (2009)
  • 著者名/発表者名: T.Kikuchi, K.Usui, T.Takahashi, H.Mihara
  • 学会等名: 3rd Asia-Pacific International Peptide Symposium
  • 発表場所: Jeju (Korea)
  • 年月日: 20091108-20091111
• [学会発表] Construction of detection system for Amyloid beta peptide localization and aggregation using fluorescent and luminescent fusion proteins (2009)
  • 著者名/発表者名: K.Usui, M.Mie, T.Andou, N.Sugimoto, H.Mihara, E.Kobatake
  • 学会等名: 第46回ペプチド討論会
  • 発表場所: 福岡県北九州市
  • 年月日: 20091104-20091106
• [学会発表] 細胞内外でのアミロイドβペプチドの局在と構造変化を検出できる発光・蛍光タンパク質の構築 (2009)
  • 著者名/発表者名: 臼井健二、三重正和、杉本直己、三原久和、小畠英理
  • 学会等名: 第24回生体機能関連化学シンポジウム,第12回バイオテクノロジー部会シンポジウム
  • 発表場所: 福岡県福岡市
  • 年月日: 20090913-20090915
• [学会発表] 種々の細胞系を用いた新規αへリックスペプチドの細胞導入活性スクリーニング (2009)
  • 著者名/発表者名: 菊池卓哉、臼井健二、高橋剛、三原久和
  • 学会等名: 第24回生体機能関連化学シンポジウム,第12回バイオテクノロジー部会シンポジウム
  • 発表場所: 福岡県福岡市
  • 年月日: 20090903-20090915
• [図書] 化学フロンティア22 生命現象を理解する分子ツール(第10章 デザインペプチドを用いたプロテインアレイと細胞アレイ) (2010)
  • 著者名/発表者名: 臼井健二,富崎欣也、三原久和
  • 総ページ数: 79-87
  • 出版者: 株式会社化学同人
• [図書] シングルセル解析の最前線(タンパク質・細胞分析用デザインペプチドチップ) (2010)
  • 著者名/発表者名: 臼井健二、菊池卓哉、三原久和
  • 総ページ数: 17-24
  • 出版者: 株式会社シーエムシー出版
• [図書] 超分子サイエンス&テクノロジー(プロテインチップデバイス) (2009)
  • 著者名/発表者名: 臼井健二、富崎欣也、三原久和
  • 総ページ数: 1067-1075
  • 出版者: 株式会社エヌ・ティー・エス
• [備考] ホームページ等
  • URL: http://www.usui-lab.com/
• [備考]
  • URL: http://www.konan-first.jp/graduate/ti_205_a.html
• [備考]
  • URL: http://www.konan-first.jp/database/search.php?keyword=&author=2&from_year=0&to_year=0&searchEssay=Search&hideInfo=essay#resultList