プロテオインジェクションを利用した細胞内プロテオーム解析プラットホームの構築

2010 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 21860027
• 研究種目: 研究活動スタート支援
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 生物機能・バイオプロセス
• 研究機関: 東京農工大学
• 研究代表者: 舟橋 久景 東京農工大学, 大学院・工学研究院, 助教 (60552429)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2010
• キーワード: バイオテクノロジー / プロテオーム解析 / フェムトインジェクション / 単一細胞解析 / 細胞内機能解析

研究概要

タンパク質を細胞内に直接導入し(プロテオインジェクション)、細胞応答を評価することによりタンパク質の細胞内機能を総合的に解析するという、新規細胞内プロテオーム解析の基盤技術を確立した。まず、タンパク質を機能を保持したまま直接標的単一生ES細胞へ導入する技術開発に成功した。また、DNAプローブに転写因子特異的配列を挿入することにより、生細胞内へ導入したプローブのレポーター発現効率が上昇することを明らかにした。この原理を利用したES細胞内タンパク質機能を評価する新しい測定法の可能性を示した。

研究成果

• [雑誌論文] Sox2 regulatory region 2 sequence works as a DNA nuclear targeting sequence enhancing the efficiency of an exogenous gene expression in ES cells (2010)
  • 著者名/発表者名: H.Funabashi, M.Takatsu, M.Saito, H.Matsuoka
  • 雑誌名: Biochem.Biophys.Res.Commun. 400(4) ページ: 554-558
  • 査読あり
• [雑誌論文] フェムトインジェクションによる単-ES細胞操作 (2010)
  • 著者名/発表者名: 舟橋久景, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • 雑誌名: Electrochemistry 78(10) ページ: 7-11
  • 査読あり
• [雑誌論文] インジェクションを利用した単-生細胞機能解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 舟橋久景, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • 雑誌名: Chemical Sensors 26(3) ページ: 120-126
• [学会発表] ダミーDNA導入による標的単-ES細胞の転写調節 (2011)
  • 著者名/発表者名: 大浦誠太郎, 舟橋久景, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • 学会等名: 電気化学会第78回大会
  • 発表場所: 横浜国立大学
  • 年月日: 20110329-20110331
• [学会発表] 単一ES細胞内の標的mRNA挙動解析のためのMolecular Beacon法の検討 (2011)
  • 著者名/発表者名: 小池秀樹, 舟橋久景, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • 学会等名: 電気化学会第78回大会
  • 発表場所: 横浜国立大学
  • 年月日: 20110329-20110331
• [学会発表] 標的ES細胞内の転写因子バランスコントロール法開発 (2011)
  • 著者名/発表者名: 舟橋久景, 杉元侑樹, 小池秀樹, 大浦誠太郎, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • 学会等名: 日本化学会第91春季年会
  • 発表場所: 神奈川大学横浜キャンパス
  • 年月日: 20110326-20110329
• [学会発表] Dynamic analysis of molecular beacons and functional proteins introduced into target-single ES cells by femtoinjection (2011)
  • 著者名/発表者名: 小池秀樹, 杉元侑樹, 舟橋久景, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • 学会等名: The 5th International Workshop on Approaches to Single-Cell Analysis
  • 発表場所: Tokyo, Japan
  • 年月日: 20110303-20110304
• [学会発表] Dummy DNA injection for controlling a specific transcription in a target-single ES cell (2011)
  • 著者名/発表者名: 大浦誠太郎, 舟橋久景, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • 学会等名: The 5th International Workshop on Approaches to Single-Cell Analysis
  • 発表場所: Tokyo, Japan "Young Scientists Poster Award"
  • 年月日: 20110303-20110304
• [学会発表] Dynamic analysis of gene expression balance in target single-ES cells towards a more clear-cut indicator of differentiation (2010)
  • 著者名/発表者名: 舟橋久景, 高津信, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • 学会等名: Pacifichem 2010
  • 発表場所: Honolulu, USA
  • 年月日: 20101215-20101220
• [学会発表] Oct3/4発現制御による標的ES細胞の分化誘導法開発 (2010)
  • 著者名/発表者名: 佐谷航, 舟橋久景, 大浦誠太郎, 小池秀樹, 杉元侑樹, 高津信, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • 学会等名: 2010年電気化学秋季大会
  • 発表場所: 神奈川工科大学, 厚木
  • 年月日: 20100902-20100903
• [学会発表] 標的単一細胞内の経時的遺伝子発現の解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 高津信, 舟橋久景, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • 学会等名: 第57回日本実験動物学会総会
  • 発表場所: 京都テルサ
  • 年月日: 20100512-20100514
• [学会発表] ES細胞内タンパク質のダイナミクスを利用した高効率遺伝子発現 (2010)
  • 著者名/発表者名: 舟橋久景, 高津信, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • 学会等名: 電気化学会第77回大会
  • 発表場所: 富山大学五福キャンパス
  • 年月日: 20100329-20100331
• [学会発表] ES細胞内遺伝子発現バランス測定法の開発 (2010)
  • 著者名/発表者名: 舟橋久景, 佐谷航, 高津信, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • 学会等名: 日本化学会第90春季年会
  • 発表場所: 近畿大学本部キャンパス
  • 年月日: 20100326-20100329
• [学会発表] フェムトインジェクションによる導入分子の細胞内挙動のリアルタイム解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 高津信, 舟橋久景, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • 学会等名: 2009年電気化学秋季大会
  • 発表場所: 東京農工大学小金井キャンパス
  • 年月日: 20090910-20100911
• [学会発表] フェムトインジェクションによるマウスES細胞への遺伝子導入解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 斉藤美佳子, 高津信, 舟橋久景, 松岡英明
  • 学会等名: 電気通信大学・東京農工大学第6回合同シンポジウム
  • 発表場所: 東京農工大学小金井キャンパス
  • 年月日: 2009-12-05
• [学会発表] Semi-quantitative expression of target genes in mouse ES single-cells by femto-injection (2009)
  • 著者名/発表者名: Mikako Saito, Makoto Takatsu, Tsukasa Kaeriyama, Hisakage Funabashi, Hideaki Matsuoka
  • 学会等名: The sixth annual meeting of The Asia Reproductive Biotechnology Society
  • 発表場所: Siem Reap, Cambodia
  • 年月日: 2009-11-16
• [備考] ホームページ等