エンドポイント蛍光消光法を用いた水系病原微生物の簡便・正確定量法の確立

2010 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 21860094
• 研究種目: 研究活動スタート支援
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 土木環境システム
• 研究機関: 国立保健医療科学院
• 研究代表者: 岸田 直裕 国立保健医療科学院, 生活環境研究部, 主任研究官 (10533359)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2010
• キーワード: 水資源 / 水循環 / 遺伝子 / 病原微生物 / クリプトスポリジウム

研究概要

簡便・正確な病原微生物の定量法として、新規遺伝子定量法であるエンドポイント蛍光消光法に着目し、実用的な定量法の確立を試みた。水系病原微生物の代表例としてクリプトスポリジウムを選定し、定量系の検討を行った結果、再現性の高い検量線が作成可能であった。またその定量系を用い、実河川水中のクリプトスポリジウムを測定した結果、高価な装置を必要とするリアルタイムPCR法による定量値と非常に近い値を得た。

研究成果

• [雑誌論文] Quantitative detection of Cryptosporidium oocyst in water source based on 18S rRNA by alternately binding probe competitive reverse transcription polymerase chain reaction(ABC-RT-PCR) (2012)
  • 著者名/発表者名: Kishida N., Miyata R., Furuta A., Izumiyama S., Tsuneda S., Sekiguchi S., Noda N. and Akiba M.
  • 雑誌名: Water Research 巻: Vol.46, No.1 ページ: 187-194
  • DOI: doi:10.1016/j.watres.2012.03.010
  • 査読あり
• [学会発表] Quantitative detection of Cryptosporidium oocyst in water source by alternately binding probe competitive polymerase chain reaction(ABC-PCR) (2011)
  • 著者名/発表者名: Kishida N., Miyata R., Furuta A., Izumiyama S., Morita S., Tsuneda S., Sekiguchi Y., Noda N., Akiba M.
  • 学会等名: The 16th International Symposium on Health-Related Water Microbiology
  • 発表場所: Rotorua ; New Zeeland
  • 年月日: 20110900
• [学会発表] 水道クリプトスポリジウム検査への遺伝子検査法導入に関する研究 (2010)
  • 著者名/発表者名: 岸田直裕,今野祥顕,秋葉道宏,猪又明子,泉山信司
  • 学会等名: 第4回保健医療科学研究会
  • 発表場所: 和光
  • 年月日: 20101200
• [学会発表] 新規遺伝子定量手法ABC-PCR法を用いた水中の病原微生物の定量 (2010)
  • 著者名/発表者名: 岸田直裕,秋葉道宏,泉山信司,宮田亮,野田尚宏,関口勇地,古田篤史,常田聡
  • 学会等名: 第44回日本水環境学会年会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 20100300