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近年、成体における神経幹細胞の存在が明らかになり再生医療への応用といった点からもその運命制御の研究が活発に行われている。神経幹細胞は成体脳において脳室下帯や海馬歯状回といった限局した領域にのみ存在することから未分化維持ニッチの存在が想定されているがその実体は殆ど不明である。先行研究により、成体神経幹細胞の未分化維持にはNotchの活性化が重要である事が知られている。そこで本研究ではNotchリガンド発現細胞がNotchの活性化を介して未分化維持ニッチとして機能するかを検討することを目的とした。平成21年度は、NotchリガンドであるDll1が成体脳室下帯においてどのような発現パターンをするのかを詳細に解析した。成体脳室下帯には神経幹細胞とその子孫細胞、上衣細胞、血管内皮細胞などが存在しており、どの細胞がDll1を発現しているのかを各種細胞マーカーとの免疫共染色により調べた。また、Dll1発現細胞と神経幹細胞との関連についても解析を行った。神経幹細胞の適切なマーカーは存在しないが、増殖頻度が非常に遅いという神経幹細胞の性質を利用してBrdUを長期間保持する細胞を神経幹細胞として解析を行った。また、Dll1コンディショナルノックアウトマウスとタモキシフェンでCreリコンビナーゼを誘導できるマウスを用いて成体においてDll1をノックアウトして成体神経幹細胞の維持に対するDll1の寄与を検討している。ノックアウト後における神経幹細胞の数についてはBrdU長期保持細胞数により評価し、その他の分化細胞の数については各種分化細胞マーカーを用いた免疫染色によりその数を評価している。
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