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2009 年度 実績報告書

全身獲得抵抗性反応におけるサリチル酸シグナル伝達機構の解析

研究課題

研究課題/領域番号 21880033
研究種目

若手研究(スタートアップ)

研究機関香川大学

研究代表者

多田 安臣  香川大学, 総合生命科学研究センター, 准教授 (40552740)

キーワードサリチル酸 / 複合体解析 / シロイヌナズナ / 植物病理学
研究概要

SAシグナル伝達におけるNPR1の転写コアクチベーターとしての役割を理解するために、NPR1-GFP植物を用い、NPR1複合体解析を行った。まず、GFP抗体を用いた免疫沈降実験(IP)を行ったが、これによりNPR1オリゴマー複合体の精製に成功した。本複合体タンパク質をコマジー染色により確認後、同バンドを切り出し、質量分析装置に供試した。その結果、オリゴマー複合体メンバーとしてNPR1及び葉緑体由来のタンパク質であるEF-Tuが検出された。EF-Tuは原核生物におけるタンパク質の翻訳に関与するタンパク質であり、リボソームにtRNAを輸送する役割で知られている。一方、EF-Tuの生化学的研究より、同タンパク質は複数のレドックス感受性のシステインを有することが知られている。そこで、NPR1オリゴマーの形成にEF-Tuがどのような役割を担っているかを明らかにするために、EF-Tuのノックアウト植物を用い、SA応答時のNPR1オリゴマー・モノマーの動性をウエスタンブロットで確認した。その結果、EF-Tu変異体では、NPR1オリゴマーの形成は一過的で弱いものであった。また、活性型であるNPR1モノマーの蓄積も同様に一過的で、野生型に比べ量的にも少なかった。現在、in vitro転写翻訳系により生成したEF-Tu及びNPR1を用いて、どのシステインが相互作用に必須であるかを解析中である。今後、はEF-Tuに病原体を接種し、抵抗性反応が影響を受けているかも検討する。

  • 研究成果

    (2件)

すべて 2010 2009

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (1件)

  • [雑誌論文] Proteasome-mediated turnover of the transcription coactivator NPR1 plays dual roles in regulating plant immunity2009

    • 著者名/発表者名
      Spoel SH
    • 雑誌名

      Cell 137巻

      ページ: 860-872

    • 査読あり
  • [学会発表] The redox and proteolysis-coupled transcription cycles regulate the salicylic acid signaling2010

    • 著者名/発表者名
      多田安臣
    • 学会等名
      第51回日本植物生理学会年会
    • 発表場所
      熊本大学
    • 年月日
      2010-03-21

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公開日: 2011-06-16   更新日: 2016-04-21  

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