研究課題
植物においてブラシノステロイド（BR）の生理作用に必要な遺伝子セットの発現調節を担うマスター転写因子BIL1/BZR1がBR応答性遺伝子のプロモーター上の塩基配列に結合し、その転写を正と負の双方向に制御する分子実態はまだ十分に理解されていない。これまでに、BIL1/BZR1はDNA主鎖の形状読み取りにより間接的にNN-BRRE-core配列の両側に隣接するそれぞれ2塩基の配列を識別することで転写の制御方向を見分ける機構をもつことが明らかになり、BIL1/BZR1による直接的なBR応答性遺伝子の発現誘導においては、他の転写因子や共役因子と協働的にDNAを認識する必要性が示唆された。本年度は、BIL1/BZR1との相互作用が報告されているPIF4との協働的な作用の解析に引き続き取り組んだ。検討の結果、in vitroタンパク質合成系と融合タグの組み合わせによりBIL1/BZR1及びPIF4の全長タンパク質の取得に成功し、タンパク質間相互作用解析とDNA結合解析から両者がDNA結合ドメインとは異なる領域で複合体を形成することが強く示唆された。さらに、複数の転写因子及び共役因子の共存下でDNA結合配列を解析するためのDAP-seq解析系を構築した。BIL1/BZR1とPIF4に加え、BIL1/BZR1に核内で相互作用する新規因子を組み合わせて取得したDAP-seqデータからBR応答性遺伝子のプロモーター上における塩基配列パターンの解析が進んでいる。本研究では、BIL1/BZR1と相互作用する複数の転写因子が見出されており、これら転写因子との組み合わせに対してもDAP-seq解析系を適用することで、BIL1/BZR1を介したBR応答性遺伝子の発現調節機構の解明が期待される。
令和5年度が最終年度であるため、記入しない。
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