| 研究課題/領域番号 |
21H02525
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| 研究機関 | 名古屋大学 |
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研究代表者 |
中野 俊詩 名古屋大学, 理学研究科, 講師 (60608529)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| キーワード | 線虫C. elegans / 神経間情報伝達 / ヘミチャネル / 行動制御 / 神経活動計測 |
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| 研究実績の概要 |
昨年度までの研究成果から、イネキシンタンパク質をコードするUNC-7が線虫温度走性行動に必須の役割を果たすことが明らかとなっていた。イネキシンタンパク質は、隣り合う細胞の細胞質を連結させるギャップ結合因子として機能する一方で、単一細胞膜上のヘミチャネルとして作用することも知られている。そこで、UNC-7がギャップ結合あるいはヘミチャネルのどちらの形態で温度走性を制御するのかを検証した。ギャップ結合能を消失させる変異型UNC-7を作出し、この変異型unc-7遺伝子をunc-7変異体に導入すると、変異体の温度走性行動異常が回復した。このことから、UNC-7はヘミチャネルとして機能して温度走性を制御していることが明らかとなった。昨年度までの研究成果と合わせると、UNC-7は温度を受容するAFD感覚ニューロンでヘミチャネルとして機能し、AFDニューロンから介在ニューロンへの情報伝達を制御していることが明らかとなった。
さらに、UNC-7を介したAFDニューロンからの温度情報がどの介在ニューロンに伝達されているのかを明らかにするために、介在ニューロンの殺傷系統をもちいたハイスループット行動解析を行なった。この解析から、２種類の介在ニューロン（AIY、RMD）がUNC-7を介した温度情報の受け取り手であることが明らかとなった。特に、UNC-7ヘミチャネルを介した情報伝達には、AIY介在ニューロンが重要であることが明らかとなった。さらに、UNC-7ヘミチャネルおよびAIY介在ニューロンは、「カーブ」と呼ばれる前進中の移動方向の制御に関与していることを見出した。今後は、AIYニューロンにおけるカルシウムイメージングなどを行い、ヘミチャネルによる神経細胞活動制御機構に迫る。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
本年度は、UNC-7の作用形態がヘミチャネルであることを明らかにすることができた。この進展は、神経細胞間情報伝達機構を明らかにする上で非常に大きな成果である。また、UNC-7を介した情報伝達の受け取り手である神経細胞を同定することができた。今後は、これらの神経細胞のカルシウムイメージングを行うことで、この新しい神経細胞間情報伝達機構を明らかにしていく。以上の進捗から、研究計画は概ね順調に進展していると考えられる。
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| 今後の研究の推進方策 |
最終年度である来年度では、AIY介在ニューロンのカルシウムイメージングを行い、UNC-7ヘミチャネルがこのニューロンの活動をどのように制御しているのかを明らかにする。具体的には、自由に行動する線虫のAFDおよびAIYニューロンにカルシウムプローブを発現させ、温度刺激を与えながらこれらのニューロンのカルシウム動態を計測する。これによって、UNC-7ヘミチャネルがAFD-AIY細胞間の情報伝達に果たす役割を明らかにする。
上記の解析から、UNC-7がAFD-AIY神経細胞間の情報伝達に関与していることが明らかとなった場合は、そのメカニズムをさらに追究していく。具体的には、AFD-AIY間のコミュニケーションはグルタミン酸が関与していることが知られている。そこで、グルタミン酸イメージングを行い、UNC-7ヘミチャネルがAFDからのグルタミン酸放出に関与しているのかを明らかにする。さらに、UNC-7ヘミチャネルによるグルタミン酸放出の制御が、シナプス小胞からのグルタミン酸放出を制御することによって実現しているのか、あるいはグルタミン酸が直接UNC-7ヘミチャネルを透過して放出されるのかを遺伝学的に検証する。これらの解析からヘミチャネルを介した新しい神経細胞間情報伝達機構を明らかにする。
来年度に、上記の実験結果をまとめて、論文として発表する。
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