自己抗体産生に特異的な経路の同定

2022 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 21H02964
• 研究機関: 順天堂大学
• 研究代表者: 三宅 幸子 順天堂大学, 医学部, 教授 (50266045)
• 研究分担者: 千葉 麻子 順天堂大学, 医学部, 准教授 (40532726)
• 研究期間 (年度): 2021-04-01 – 2024-03-31
• キーワード: 自己免疫 / 自己抗体 / B細胞 / T細胞

研究実績の概要

本申請では、(CD25+NB)が自己抗体産生細胞に分化していく過程を明らかにすることによって、自己抗体産生にユニークな経路の解明をめざしている。CD25+NBの特徴を解析するために、視神経脊髄炎（NMO）、健常人、健常人ワクチン2回接種後の人から、CD25+NB、CD25-NBを分離し、RNAseq解析を行った。NMOでは、健常人とワクチン接種後の検体では発現遺伝子が類似していたが、NMOではこれら２群と異なっており、自己免疫に特有の特徴があることが推定された。NMOのCD25+NBでは、CD25-NBと比較するとBcl６やBach2の発現が低下しており、抗体産生細胞に特徴的な遺伝子発現パターンになっていることに加え、CD25発現抑制に関与する転写因子の低下がみられた。NMOのCD25+NB中に、自己抗体産生細胞が多く存在するかどうかについて検討を行った。CD25+NBを抗体産生細胞に分化させ、その培養上清中の抗AQP4抗体の検出を試みた。AQP4を強制発現させた細胞株を作成するなど検出系の改善を行ったが、上清には十分なIgが得られず検出にはいたらなかった。そこで、NMOのCD25陽性、CD25陰性それぞれのnaive B細胞をEBウイルスを用いて不死化し、抗体産生細胞に分化させた。CD25+NBから不死化した細胞がCD25-NB中から不死化した細胞よりも抗体産生細胞に分化しやすいことが確認できたが、培養上中清では抗AQP4抗体は検出できなかった。自己抗体産生を助ける新規T細胞の同定に関する研究では、CD４＋キラー細胞のNMO患者で増加しているか症例数を増やして検討したところ、CD４＋キラー細胞が増加している患者がいることがわかった。この細胞が抗体産生を増強するかどうかについては、現在検討中である。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

自己抗体産生細胞に分化するB細胞の同定に関する研究では、CD25+NBの特徴を解析するために、NMO、健常人、健常人ワクチン2回接種後の人から、naive B細胞のCD25陽性と陰性の細胞を分離し、RNAseq解析を行い、その特徴を明らかにした。これはほぼ予定通りである。CD25+NBから分化した抗体産生細胞が抗AQP4抗体を産生するかどうか検討を行うため、検出系の改善としてAQP4を強制発現させた細胞株を作成した。またnaive B細胞については、EBウイルスを用いて不死化し、抗体産生細胞に分化させることも予定通り行いほぼ計画通りといえる。自己抗体産生を助ける新規T細胞の同定に関する研究では、CD４＋キラー細胞のNMO患者で増加しているか症例数を増やして検討したところ、CD４＋キラー細胞が増加している患者がいることがわかり、ほぼ予定通りといえる。

今後の研究の推進方策

自己抗体産生細胞に分化するB細胞の同定: NMO患者末梢血CD25+NBでは、健常人、健常人ワクチン2回接種後の人のnaive B細胞のCD25陽性細胞は陰性細胞よりも抗体産生細胞に発現する分子の発現が亢進しており、特にNMO患者において顕著であることがわかった。本年度は、NMO患者のnaive B細胞のCD25陽性と陰性の細胞、さらにSwitched memory B細胞を分離し、レパトア解析を行う。また、NMO患者では、CD25+NBが増加する原因を検索する。さらに、NMO患者では、CD25+NBと病勢が関与するかどうか検索する。
自己抗体産生を助ける新規T細胞の同定：NMO末梢血のシングルセル細胞解析から、健常人と比較して増加しているT細胞集団があるかどうかを検討したところ、CD４＋キラー細胞が増加していた。本年は、引き続きCD４＋キラー細胞のNMO患者での疾患活動性との相関を検討する。また、CD４＋キラー細胞に抗体産生促進機能があるかどうかをB細胞との共培養系を用いて検証を続ける。

研究成果

• [雑誌論文] Pretreatment Frequency of Circulating Th17 Cells and FeNO Levels Predicted the Real-World Response after 1 Year of Benralizumab Treatment in Patients with Severe Asthma (2023)
  • 著者名/発表者名: Sandhu Yuuki、Harada Norihiro、Sasano Hitoshi、Harada Sonoko、Ueda Shoko、Takeshige Tomohito、Tanabe Yuki、Ishimori Ayako、Matsuno Kei、Abe Sumiko、Nagaoka Tetsutaro、Ito Jun、Chiba Asako、Akiba Hisaya、Atsuta Ryo、Izuhara Kenji、Miyake Sachiko、Takahashi Kazuhisa
  • 雑誌名: Biomolecules 巻: 13 ページ: 538～538
  • DOI: 10.3390/biom13030538
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] First-in-human clinical trial of the NKT cell-stimulatory glycolipid OCH in multiple sclerosis (2023)
  • 著者名/発表者名: Sato Wakiro、Noto Daisuke、Araki Manabu、Okamoto Tomoko、Lin Youwei、Yamaguchi Hiromi、Kadowaki-Saga Ryoko、Kimura Atsuko、Kimura Yukio、Sato Noriko、Ishizuka Takami、Nakamura Harumasa、Miyake Sachiko、Yamamura Takashi
  • 雑誌名: Therapeutic Advances in Neurological Disorders 巻: 16 ページ: -
  • DOI: 10.1177/17562864231162153
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Gasdermin D-mediated release of IL-33 from senescent hepatic stellate cells promotes obesity-associated hepatocellular carcinoma (2022)
  • 著者名/発表者名: Ryota Yamagishi, Fumitaka Kamachi, Masaru Nakamura, Shota Yamazaki, Tomon-ori Kamiya, Masaki Takasugi, Yi Cheng, Yoshiki Nonaka, Yoshimi Yukawa-Muto, Le Thi Thanh Thuy, Hisaya Akiba, Sachiko Miyake
  • 雑誌名: Science Immunology 巻: 7 ページ: -
  • DOI: 10.1126/sciimmunol.abl7209
  • 査読あり
• [雑誌論文] Early CD4+ T cell responses induced by the BNT162b2 SARS-CoV-2 mRNA vaccine predict immunological memory (2022)
  • 著者名/発表者名: Bai Jie、Chiba Asako、Murayama Goh、Kuga Taiga、Yahagi Yoshiyuki、Tabe Yoko、Tamura Naoto、Miyake Sachiko
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 12 ページ: -
  • DOI: 10.1038/s41598-022-24938-4
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] Gut environmental factors and nuroinflammation (2023)
  • 著者名/発表者名: 三宅幸子
  • 学会等名: 第9回Neuro Science Network in KOBEシンポジウム
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] 精神的ストレスによる皮膚アレルギー増悪メカニズム (2023)
  • 著者名/発表者名: 吉川 宗一郎、浦上 仁志、藤田 悠紀、長尾 圭、佐野 修平、三宅 健介、烏山 一、森実 真、神谷 厚範、三宅 幸子
  • 学会等名: 日本薬学会第143年会
• [学会発表] 脊椎関節炎と自然T細胞 (2022)
  • 著者名/発表者名: 三宅幸子
  • 学会等名: 第66回日本リウマチ学会総会・学術集会
  • 招待講演
• [学会発表] 自己免疫疾患におけるInnate系細胞の解析 ～関節リウマチ等の膠原病の病態理解に向けて～ (2022)
  • 著者名/発表者名: 三宅幸子
  • 学会等名: Rheumatology Conference 2022
  • 招待講演
• [学会発表] 全身性エリテマトーデスにおける自然免疫の役割 (2022)
  • 著者名/発表者名: 三宅幸子
  • 学会等名: TEN TOPICS IN RHEUMATOROGY 2022
  • 招待講演
• [学会発表] 腸・免疫・神経のクロストーク (2022)
  • 著者名/発表者名: 三宅幸子
  • 学会等名: 第34回日本神経免疫学会学術集会
  • 招待講演
• [学会発表] 神経免疫update (2022)
  • 著者名/発表者名: 三宅幸子
  • 学会等名: 副都心膠原病カンファレンス
  • 招待講演
• [学会発表] SLE単球におけるcGAS-STING経路を介したIFNα産生亢進メカニズムの解明 (2022)
  • 著者名/発表者名: 久我大雅、千葉麻子、江端豪、草生真規雄、山路健、田村直人、三宅幸子
  • 学会等名: 第119回日本内科学会講演会
• [学会発表] SLE単球におけるcGAS-STING経路を介したIFNα産生抗進機序の解析 (2022)
  • 著者名/発表者名: 久我大雅、千葉麻子、村山豪、草生真規雄、山路健、田村直人、三宅幸子
  • 学会等名: 第66回日本リウマチ学会総会・学術集会
• [学会発表] IL-18/IL-18receptor-αシグナルの抗体誘導関節炎への関与 (2022)
  • 著者名/発表者名: 海江田信二郎、木下隆、千葉麻子、三宅幸子、星野友昭
  • 学会等名: 第66回日本リウマチ学会総会・学術集会
• [学会発表] OVA誘導性喘息モデルマウスにおけるMAIT細胞の役割 (2022)
  • 著者名/発表者名: 笹野 仁史, 原田 紀宏, 三道 ユウキ, 田辺 悠記, 原田 園子, 渡邉 敬康, 佐藤 良彦, 西牧 孝泰, 安部 寿美子, 上田 翔子, 後藤 愛, 竹重 智仁, 松野 圭, 伊藤 潤, 長岡 鉄太郎, 熱田 了, 千葉 麻子, 秋葉 久弥, 三宅 幸子, 高橋 和久
  • 学会等名: 第62回日本呼吸器学会学術講演会
• [学会発表] 全身性エリテマトーデスとCOVID-19における炎症性サイトカイン産生の比較 (2022)
  • 著者名/発表者名: 村山豪、西岡雄仁、草生真規雄、松下靖志、千葉麻子、三宅幸子、山路健、田村直人
  • 学会等名: 第66回日本リウマチ学会総会・学術集会
• [学会発表] スギ花粉症合併喘息患者における舌下免疫療法による症状改善効果と末梢血リンパ球分画の変化 (2022)
  • 著者名/発表者名: 上田翔子、伊藤潤、原田園子、笹野仁史、三道ユウキ、田辺悠記、安部寿美子、渡邉敬康、佐藤良彦、西牧孝泰、牧野文彦、塩田智美、児玉裕三、長岡鉄太郎、千葉麻子、秋葉久弥、三宅幸子、熱田了、原田紀宏、高橋和久
  • 学会等名: 第88回臨床アレルギ―研究会
• [学会発表] 末梢血中MAIT細胞、好中球、血清ぺリオスチンのメポリズマブ治療効果予測バイオマーカーとしての可能性 (2022)
  • 著者名/発表者名: 笹野 仁史、原田 紀宏、原田 園子、竹重智仁、三道 ユウキ、田辺 悠記、石森絢、松野圭、長岡鉄太郎、伊藤 潤、千葉麻子、秋葉久弥、熱田了、出原賢治、三宅幸子、高橋和久
  • 学会等名: 第3回日本喘息学会学術大会
• [学会発表] SLE患者単球におけるcGAS-STING経路を介したIFNα産生亢進機序の解明 (2022)
  • 著者名/発表者名: 久我大雅、千葉麻子、村山豪、草生真規雄、山路健、田村直人、三宅幸子
  • 学会等名: 第50回日本臨床免疫学会総会
• [学会発表] SARS-CoV-2 mRNAワクチンにより誘導される獲得免疫応答の解析 (2022)
  • 著者名/発表者名: JIE BAI、千葉麻子、村山豪、久我大雅、田村直人、三宅幸子
  • 学会等名: 第50回日本臨床免疫学会総会
• [学会発表] 精神的ストレスによるアレルギー皮膚炎症増悪メカニズムの解明 (2022)
  • 著者名/発表者名: 吉川宗一郎、浦上仁志、藤田悠紀、長尾圭、日野翔太、松井奎吾、三宅健介、烏山一、森実実、神谷厚範、三宅幸子
  • 学会等名: 第34回日本神経免疫学会学術集会
• [学会発表] 視神経脊髄炎におけるnaiveB細胞の解析 (2022)
  • 著者名/発表者名: 佐野修平、吉川宗一郎、能登大介、星野泰延、富沢雄二、横山和正、服部信孝、三宅幸子
  • 学会等名: 第34回日本神経免疫学会学術集会
• [学会発表] 視神経脊髄炎におけるnaiveB細胞に着目した自己抗体産生機序の検討 (2022)
  • 著者名/発表者名: 佐野修平、吉川宗一郎、能登大介、星野泰延、富沢雄二、横山和正、服部信孝、三宅幸子
  • 学会等名: 第9回ベーシックリサーチカンファレンス
• [学会発表] SLE単球のcGAS-STING経路を介したIFNα産生はGATA4発現誘導により亢進する (2022)
  • 著者名/発表者名: 久我大雅、千葉麻子、村山豪、草生真規雄、山路健、田村直人、三宅幸子
  • 学会等名: 第9回ベーシックリサーチカンファレンス
• [学会発表] Early CD4+T cell responses elicited by COVID-19 mRNA vaccine predicts long term immunological memory (2022)
  • 著者名/発表者名: JIE BAI, Asako Chiba, Goh Murayama, Taiga Kuga, Yoshiyuki Yahagi, Naoto Tamura, Sachiko Miyake
  • 学会等名: 第51回日本免疫学会学術集会
• [学会発表] Chronic psychological stress exacerbates IgE-dependent chronic allergic inflammation by suppressing M2-macrophage-mediated efferocytosis (2022)
  • 著者名/発表者名: Hitoshi Urakami, Yuki Fujita, Kei Nagao, Kensuke Miyake, Hajime Karasuyama, Sachiko Miyake, Soichiro Yoshikawa
  • 学会等名: 第51回日本免疫学会学術集会
• [学会発表] Analysis of naive B cell in neuromyelitis optica spectrum disorders (2022)
  • 著者名/発表者名: Shuhei Sano, Soichiro Yoshikawa, Daisuke Noto, Yasunobu Hoshino, Yuji Tomi-zawa, Kazumasa Yokoyama, Nobutaka Hattori, Sachiko Miyake
  • 学会等名: 第51回日本免疫学会学術集会
• [学会発表] Benign and harmful au-toimmunity by manipulating the binding stability of self-peptides that influence the kinetics of tissue antigen-specific effector regulatory T cells (2022)
  • 著者名/発表者名: Youwei Lin, Shun Sakuraba, Chandirasegaran Massilamany, Jayagopala Reddy, Yoshmasa Tanaka, Sachiko Miyake, Takashi Yamamura
  • 学会等名: 第51回日本免疫学会学術集会
• [学会発表] Ligand-independent function of β2-adrenergic receptor af-fects IgE-mediated Ca2+-influx in mast cells (2022)
  • 著者名/発表者名: Kei Nagao, Yuki Fujita, Hitoshi Urakami, Atsunori Kamiya, Sachiko Miyake, Soichiro Yoshikawa
  • 学会等名: 第51回日本免疫学会学術集会
• [学会発表] Soluble TIM-4 levels in serum are associated with severe aasthma phenotype (2022)
  • 著者名/発表者名: Yuki Tanabe, Hisaya Akiba, Norihiro Harada, Harada Sonoko, Takahashi Kazuhisa, Sachiko Miyake
  • 学会等名: 第51回日本免疫学会学術集会
• [学会発表] Environmental enrichment suppresses skin allergic inflamma-tion in mice (2022)
  • 著者名/発表者名: Yuki Fujita, Hitoshi Urakami, Kei Nagao, Atsunori Kamiya, Sachiko Miyake, Soichiro Yoshikawa
  • 学会等名: 第51回日本免疫学会学術集会
• [学会発表] GATA4 enhances cGAS-STING-dependent production of type I interferons in lupus monocytes (2022)
  • 著者名/発表者名: Taiga Kuga, Asako Chiba, Gou Murayama, Kosuke Hosomi, Tomoya Nakagawa, Makio Kusaoi, Ken Yamaji, Naoto Tamura, Sachiko Miyake
  • 学会等名: 第51回日本免疫学会学術集会
• [学会発表] 全身性エリテマトーデス患者の単球におけるSTING刺激時のinterferonα産生能と貪食能についての検討 (2022)
  • 著者名/発表者名: 細見 航介, 久我 大雅, 千葉 麻子, 村山 豪, 草生 真規雄, 山路 健, 田村 直人, 三宅 幸子
  • 学会等名: 日本リウマチ学会関東支部学術集会
• [備考] researchmap
  • URL: https://researchmap.jp/miyakesachiko
• [備考] 順天堂大学医学部 順天堂大学大学院医学研究科 免疫学講座ホームページ
  • URL: https://www.juntendo.ac.jp/graduate/laboratory/labo/meneki/home.html