新型ウイルス感染症を標的とした新たな免疫治療法確立のための基盤研究

2022 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 21H02966
• 研究機関: 富山大学
• 研究代表者: 村口 篤 富山大学, 医学部, 名誉教授 (20174287)
• 研究分担者: 岸 裕幸 富山大学, 学術研究部医学系, 教授 (60186210) ; 小澤 龍彦 富山大学, 学術研究部医学系, 准教授 (10432105) ; 小林 栄治 富山大学, 学術研究部医学系, 助教 (70459733) ; 浜名 洋 富山大学, 大学院医学薬学研究部(医学), 助教 (90551549) [辞退] ; 宇高 恵子 高知大学, 教育研究部医療学系基礎医学部門, 教授 (40263066)
• 研究期間 (年度): 2021-04-01 – 2024-03-31
• キーワード: ウイルス感染症 / 次世代型免疫療法 / TCR様抗体 / TCR遺伝子治療

研究実績の概要

【研究課題１】
ウイルスペプチド/HLAを認識する高親和性TCR様抗体のBiTE作製と評価：前年度に取得したウイルスペプチド/HLAを認識する高親和性TCR様抗体を用いてBiTEを作製し、機能を評価した。BiTEは、TCR様抗体(BRLF1p/HLA-A24抗体)と抗CD-scFvのキメラ蛋白(BRLF1p/HLA-A24抗体/CD3 BiTE)を作製した。機能評価はHLA24陰性の末梢血CD3+リンパ球と標的細胞(あらかじめBRLF1pをパルスしたルシフェラーゼ発現型T2-A24細胞株(BRLF1p/T2-A24-Luc)を共培養し、Luc蛍光を測定して傷害活性を評価した。その結果、我々が作成したBiTEは標的細胞を傷害することが実証され、取得した高親和性TCR様抗体のBiTEが将来臨床応用される可能性が示唆された。
【研究課題2】
健常人・新型コロナ感染患者のウイルスペプチド特異的T細胞の同定：宇高らは、先に作製したHLA-A*24:02結合性ペプチド予測プラットフォームを用いて、新型コロナウイルスのスパイク蛋白由来ペプチドを複数予測することに成功した。その結果、新型コロナワクチン接種健常人あるいは感染者の末梢血T細胞からコロナウイルスペプチド特異的キラーT細胞を効率的に取得できる可能性が示された。さらに、MHC class II分子へのペプチドの結合活性を測るための技術を新しく樹立して、HLA-DRB1*04:05、DRB1*08:03について、任意のペプチドの結合値を予測する自動予測プラットフォームの作製に成功した。その結果、コロナウイルス特異的キラーT細胞のみならず、コロナウイルス特異的ヘルパーT細胞のTCRの効率的取得への道が世界に先駆けて開けた。

現在までの達成度 (段落)

翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。

今後の研究の推進方策

翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Rapid cloning of antigen-specific T-cell receptors by leveraging the cis activation of T cells (2022)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi Eiji、Jin Aishun、Hamana Hiroshi、Shitaoka Kiyomi、Tajiri Kazuto、Kusano Seisuke、Yokoyama Shigeyuki、Ozawa Tatsuhiko、Obata Tsutomu、Muraguchi Atsushi、Kishi Hiroyuki
  • 雑誌名: Nature Biomedical Engineering 巻: 6 ページ: 806～818
  • DOI: 10.1038/s41551-022-00874-6
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Evaluation of chimeric antigen receptor of humanized rabbit‐derived T cell receptor‐like antibody (2022)
  • 著者名/発表者名: Nakamura Tomoko、Kobayashi Eiji、Hamana Hiroshi、Hayakawa Yoshihiro、Muraguchi Atsushi、Hayashi Atsushi、Ozawa Tatsuhiko、Kishi Hiroyuki
  • 雑誌名: Cancer Science 巻: 113 ページ: 3321～3329
  • DOI: 10.1111/cas.15478
  • 査読あり
• [雑誌論文] The SARS-CoV-2 Omicron BA.1 spike G446S mutation potentiates antiviral T-cell recognition (2022)
  • 著者名/発表者名: Motozono Chihiro、Toyoda Mako、Tan Toong Seng、Hamana Hiroshi、Goto Yoshihiko、Aritsu Yoshiki、Miyashita Yusuke、Oshiumi Hiroyuki、Nakamura Kimitoshi、Okada Seiji、Udaka Keiko、Kitamatsu Mizuki、Kishi Hiroyuki、Ueno Takamasa
  • 雑誌名: Nature Communications 巻: 13 ページ: 5440
  • DOI: 10.1038/s41467-022-33068-4
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dissecting Naturally Arising Amino Acid Substitutions at Position L452 of SARS-CoV-2 Spike (2022)
  • 著者名/発表者名: Tan Toong Seng、Toyoda Mako、Ode Hirotaka、Barabona Godfrey、Hamana Hiroshi、Kitamatsu Mizuki、Kishi Hiroyuki、Motozono Chihiro、Iwatani Yasumasa、Ueno Takamasa
  • 雑誌名: Journal of Virology 巻: 96 ページ: e011622
  • DOI: 10.1128/jvi.01162-22
  • 査読あり
• [学会発表] Selection of high avidity TCRs based on the expression of marker on BW cells (2022)
  • 著者名/発表者名: My H, Hamana H, Kobayashi E, Ozawa T, Hayee A, Kishi H
  • 学会等名: 第26回日本癌免疫学会総会
• [学会発表] T-ISAAC法によるがん特異的TCRの同定 (2022)
  • 著者名/発表者名: 小林栄治、下岡清美、横山茂之、岸裕幸
  • 学会等名: 第81回日本癌学会学術総会
• [学会発表] 新型コロナウイルスOmicron BA.1株のG446S変異はT細胞の抗ウイルス活性を増強する (2022)
  • 著者名/発表者名: 本園千尋、豊田真子、Toong Seng Tan、浜名洋、後藤由比古、仲摩健、有津良樹、北松瑞生、宇高恵子、岸裕幸,、上野貴将
  • 学会等名: 第69回日本ウイルス学会学術集会
• [学会発表] HLA analysis of the Nivolumab induced isolated ACTH deficiency (2022)
  • 著者名/発表者名: Udaka K, Nakata A, Nishiyama M, Funakoshi S, Shiina T, Shimizu T, Hamana H, Kishi H, Onoue K, Tanaka Y, Yamashita Y, Nakamura Y, Aihara T, Nakagawa Y
  • 学会等名: 第26回日本癌免疫学会総会
• [学会発表] Analysis of HLA- class-I unrestricted T cell receptors obtained from tumor infiltrating lymphocytes of breast cancer patients (2022)
  • 著者名/発表者名: Hayee A, Yamaguchi S, Hamana H, Shitaoka K, Kobayashi E, Ozawa T, My H, Muraguchi A, Kishi H
  • 学会等名: 第51回日本免疫学会学術集会
• [学会発表] Selection of highly responsive TCRs by analysis combining the expression of multiple markers on BW5147.3 T cells (2022)
  • 著者名/発表者名: My H, Hamana H, Kobayashi E, Ozawa T, Dang S, Hayee A, Kishi H
  • 学会等名: 第51回日本免疫学会学術集会
• [学会発表] Rapid cloning of antigen-specific T-cell receptors by applying T cell cisactivation. (2022)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi E, Ozawa T, Tajiri K, Kusano S, Yokoyama S, Muraugchi A, Kishi H.
  • 学会等名: 第51回日本免疫学会学術集会
• [学会発表] The SARS-CoV-2 Omicron BA.1 spike G446S potentiates antiviral T cell immunity (2022)
  • 著者名/発表者名: Motozono C, Toyoda M, Hamana H, Udaka K, Kishi H, Ueno T.
  • 学会等名: 第51回日本免疫学会学術集会
• [学会発表] HLA analysis of the Nivolumab-induced ACTH deficiency (2022)
  • 著者名/発表者名: Udaka K, Nishiyama M, Funakoshi S, Shiina T, Shimizu T, Komatsu T, Hamana H, Kishi H, Onoue K, Tanaka Y, Aihara T, Nakagawa Y.
  • 学会等名: 第51回日本免疫学会学術集会