| 研究課題/領域番号 |
21H03046
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| 研究機関 | 慶應義塾大学 |
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研究代表者 |
戸田 正博 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 教授 (20217508)
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| 研究分担者 |
植田 良 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 講師 (30317143)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| キーワード | Malignant glioma / iPS細胞 / 複製型レトロウイルス / 自殺遺伝子 / 遊走 |
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| 研究実績の概要 |
本年は治療用NSCに対するRRVの感染速度が遅い問題を解決するために、NSCの培養方法を比較し、ラミニンコートによる接着培養が効果的であると確認した。この培養方法によりNSCの増殖速度も格段に速くなるため、治療用細胞製剤の大量培養の問題解決にも繋がる。
また、RRVが腫瘍に感染すると腫瘍細胞が発光するin vivoウイルス感染モニタリング技術を確立した。それによりグリオーマモデルマウスに対してRRVを直接投与するよりも、CD-RRV-human NSCを投与した方が腫瘍のより広域にRRVが感染することを確認した。
治療効果に関しても、ヒトグリオーマモデルマウスに対してCD-RRV-human NSCを移植し、5-FCを投与する事で高い抗腫瘍効果を発揮することを確認した。
さらに、様々な細胞株（肺がん：A549、膵がん：Panc-1、胃がん：MKN-7、肝臓がん：HepG2、乳がん：MCF-7、繊維肉腫：HT1080）にCD-RRVが感染して自己複製すること及び5-FC投与で死滅することを確認し、その他の悪性・難治性腫瘍にも適応拡大可能であることを示せた。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
RRV単独よりもRRV-NSCを投与した方が脳腫瘍のより広域にRRVが感染することを確認し、NSCがRRVのDelivery vehicleとして有用であることをin vivoで確認できた。また、CD-RRV-NSCが生産したRRVがグリオーマモデルマウスで高い抗腫瘍効果を発揮すること、その他の悪性・難治性腫瘍にも適応拡大可能であることも示せた。
現在、RRVが脳腫瘍全体へ感染するために必要なCD-RRV-NSCの投与細胞数の条件検討に移っており、おおむね順調に進展しているといえる。
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| 今後の研究の推進方策 |
１. CD-RRV-NSCの脳腫瘍に対するDelivery vehicleの有効性を比較
GC株(U87)及びGSC株(hG008) をそれぞれ線条体に移植したヒトグリオーマモデルマウスに対してCD-RRV-human NSCを対側に移植し、遠方の腫瘍に対するRRVの感染を確認する。３色の蛍光タンパク質、３色の発光タンパク質、全脳透明化技術を用いることで、脳腫瘍に対するNSCのDelivery vehicleとしての有効性をin vivoイメージングデータと全脳３D画像データにより比較する。
2. グリオーマモデルマウスにおけるCD-RRV-human NSC投与量の検討
ヒトグリオーマモデルマウスに対して異なる細胞数でCD-RRV-human NSCを移植し、腫瘍全体にRRVが感染しているかを全脳透明化技術および3Dイメージングにより確認する。全ての腫瘍が赤色蛍光＋赤色発光で、RRVが感染した腫瘍はさらに緑色蛍光＋緑色発光で観察できるように設計されている。
３. グリオーマモデルマウスにおけるCD-RRV-human NSCの治療効果及び安全性の評価
ヒトグリオーマモデルマウスに対して異なる細胞数でCD-RRV-human NSCを移植し、5-FCを投与することで脳腫瘍に対する治療効果を評価する。投与する細胞数、5-FCの投与量などの条件を検討する。
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