| 研究課題/領域番号 |
21H04718
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| 研究機関 | 近畿大学 |
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研究代表者 |
松田 一彦 近畿大学, 農学部, 教授 (00199796)
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| 研究分担者 |
丹羽 隆介 筑波大学, 生存ダイナミクス研究センター, 教授 (60507945)
加藤 直樹 摂南大学, 農学部, 准教授 (90442946)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-05 – 2024-03-31
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| キーワード | ニコチン性アセチルコリン受容体 / 機能的発現 / 膜電位固定法 / ネオニコチノイド / 微生物二次代謝物質 |
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| 研究実績の概要 |
ショウジョウバエを対象として、Dα1、Dα2、Dα3、Dβ1およびDβ2ニコチン性アセチルコリン受容体（nAChR）サブユニットが同一の神経細胞に発現しているのか調べた結果、成虫の生殖に関与する神経細胞で、共発現していることがわかった。そこでこれらのサブユニットを複数種組み合わせてアフリカツメガエル卵母細胞で発現可能なnAChRを調べたところ、計12種のnAChRが機能的に発現可能であることが明らかになった。これらのnAChRに対するネオニコチノイドのアゴニスト活性に対するサブユニットの寄与を多変量解析を用いて定量的に調べた結果、特にDα2サブユニットはネオニコチノイドのアゴニスト活性を低下させる作用をもつことが明らかになった。Dα1、Dα2、Dα3サブユニットをコードする遺伝子の発現を神経細胞特異的に抑制した結果、成虫のショウジョウバエでネオニコチノイド過敏現象が生じ、しかもオスとメスでその程度が異なることが明らかになった。
セイヨウミツバチについては、脳内の局所的なnAChRおよび機能的発現を補助する因子の遺伝子発現を調べ、部位の違いにより変動する因子があることを確認するとともに、Dα1、Dα2、Dα3、Dβ1およびDβ2サブユニットに対応する本種のサブユニットが形成するnAChRのネオニコチノイド感受性を決定した。
糸状菌が生産するnAChR阻害物質パラヘルクアミドAの作用機構について研究し、本物質が一見非拮抗的にnAChRに作用するように見えていても、実際にはアセチルコリン結合部位に結合することが明らかになった。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
1: 当初の計画以上に進展している
理由
当初の計画通り、ショウジョウバエのニコチン性アセチルコリン受容体(nAChR)を構成するサブユニットが、変態、性分化に応じた変化を調べた上で、当該変化がnAChRに対するネオニコチノイドの活性にどのように影響するのか定量的手法を用いて明らかにした。その中で、通常標的タンパク質の発現抑制は薬剤の感受性の低下を引き起こすのに対して、ネオニコチノイドの場合には、過敏現象が生じることを発見した。プレスリリースした本研究成果に加えて、セイヨウミツバチでの組織別当のnAChRの動的変化もすでに解明している。これらの成果をふまえて当初の計画以上に進展していると判断した。
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| 今後の研究の推進方策 |
2023年度は、ショウジョウバエでこれまで機能的発現が未達成であったnAChRに対するネオニコチノイドの活性を評価し、その成果をセイヨウミツバチにまで延伸する。また、セイヨウミツバチで社会形成によって生じる脳内のnAChR構成サブユニットおよび機能的発現補助因子の発現の違いを通常のRNA-seqやsingle cell RNA-seq解析を通じて明らかにし、それがどのようにネオニコチノイド等のnAChRに対する感受性に影響するのか理解する。さらに、農業害虫等の我々人類に対して有害に働く昆虫種のnAChRにも挑戦し、それらのネオニコチノイド等の殺虫性物質に対する活性を明らかにすることで、有害昆虫種の防除法を提案する。
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