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2023 年度 実績報告書

革新的遺伝子操作技術を利用した植物ウイルス宿主特異性の分子解体

研究課題

研究課題/領域番号 21H04722
研究機関東京大学

研究代表者

山次 康幸  東京大学, 大学院農学生命科学研究科(農学部), 教授 (40345187)

研究分担者 前島 健作  東京大学, 大学院農学生命科学研究科(農学部), 准教授 (20726062)
研究期間 (年度) 2021-04-05 – 2025-03-31
キーワード植物ウイルス / ファイトプラズマ / 宿主特異性 / ファイロジェン
研究実績の概要

令和5年度は以下の研究を実施した。
1.ファイロジェンを介したin vitroタンパク質分解システムの解析:令和4年度に構築したファイロジェンを介したin vitroタンパク質分解システムをさらに最適化するため、ファイロジェンの機能領域の解析を行った。まず葉化誘導能の弱いRYDファイロジェンの解析により、RYDファイロジェンが結合するMADS転写因子の種類に応じてシャトル因子との結合性が変化し、一部のMADS転写因子は分解装置へと輸送されず、分解を受けないことを明らかにした。さらにファイロジェンの機能領域をランダムミューテーションにより解析し、ファイロジェンにおけるMADS転写因子との結合に働く相互作用面を特定し、ファイロジェンとMADS転写因子の結合モデルを構築した。
2.植物ウイルス感受性機構に関する研究:令和4年度にEXA1がeIF4Eファミリー遺伝子(eIF4e、eIFiso4E、nCBP)の全てと結合することを明らかにしたが、それらの結合がポテックスウイルスの感染に必要かどうかを検証した結果、EXA1はeIF4Eファミリーと協調して働いていることが示唆された。
3.アブラナ科植物におけるウイルス抵抗性の検証:令和4年度にポテックスウイルス抵抗性を示すアブラナ科植物を複数同定したが、それらの中でポテックスウイルス抵抗性遺伝子JAX1をもつものを対象にゲノム編集によりJAX1遺伝子の破壊を試みた結果、少なくとも1種のアブラナ科植物についてJAX1 遺伝子の破壊株を獲得した。
4.宿主特異性機構の分子解体:本研究で解明・解析したウイルス感受性遺伝子、抵抗性遺伝子、RNAi関連遺伝子について、アブラナ科植物ゲノムデータベース検索を行い、植物種ごとのウイルス宿主特異性プロファイル作成を行った。一部についてプロファイリングを完了し、植物により遺伝子保存状況が異なることを明らかにした。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

1: 当初の計画以上に進展している

理由

本研究ではファイロジェンを介したin vitroタンパク質分解システムを構築したが、本系は植物細胞由来の安定したin vitroタンパク質分解系としては初めてのシステムであるため関連分野への波及効果が期待される。また、令和5年度は成果公表についても着実に成果を挙げ、6報の学術論文として公表した。植物ウイルス感受性機構の研究において感受性遺伝子同士が強調して機能していることを突き止めたが、この成果は新聞報道等にも採りあげられた。またファイロジェンによるタンパク質分解システムについても複数の学術論文を発表し、報道等で採りあげられた。以上より今年度は当初の想定以上に進捗したと考えられる。

今後の研究の推進方策

最終年度となる令和6年度はファイロジェンを介したin vitroタンパク質分解システムの異分野での応用を想定して拡張性を持たせるための種々の解析を行う。また、ウイルスの感受性遺伝子、抵抗性遺伝子に関する研究も順調に進捗しているため、それらの成果とアブラナ科植物ゲノムデータのプロファイリングを統合してこれまで未解明であったウイルス宿主特異性に迫りたいと考えている。

  • 研究成果

    (17件)

すべて 2024 2023

すべて 雑誌論文 (6件) (うち査読あり 5件) 学会発表 (11件) (うち国際学会 4件)

  • [雑誌論文] Random mutagenesis-based screening of the interface of phyllogen, a bacterial phyllody-inducing effector, for interaction with plant MADS-box proteins2023

    • 著者名/発表者名
      Kitazawa Yugo、Iwabuchi Nozomu、Maejima Kensaku、Matsumoto Oki、Suzuki Masato、Matsuyama Juri、Koinuma Hiroaki、Oshima Kenro、Namba Shigetou、Yamaji Yasuyuki
    • 雑誌名

      Frontiers in Plant Science

      巻: 14 ページ: 1058059

    • DOI

      10.3389/fpls.2023.1058059

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Potential mobile units drive the horizontal transfer of phytoplasma effector phyllogen genes2023

    • 著者名/発表者名
      Tokuda Ryosuke、Iwabuchi Nozomu、Kitazawa Yugo、Nijo Takamichi、Suzuki Masato、Maejima Kensaku、Oshima Kenro、Namba Shigetou、Yamaji Yasuyuki
    • 雑誌名

      Frontiers in Genetics

      巻: 14 ページ: 1132432

    • DOI

      10.3389/fgene.2023.1132432

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Interaction of EXA1 and eIF4E Family Members Facilitates Potexvirus Infection in Arabidopsis thaliana2023

    • 著者名/発表者名
      Nishikawa Masanobu、Katsu Kosuke、Koinuma Hiroaki、Hashimoto Masayoshi、Neriya Yutaro、Matsuyama Juri、Yamamoto Toya、Suzuki Masato、Matsumoto Oki、Matsui Hidenori、Nakagami Hirofumi、Maejima Kensaku、Namba Shigetou、Yamaji Yasuyuki
    • 雑誌名

      Journal of Virology

      巻: 97 ページ: e0022123

    • DOI

      10.1128/jvi.00221-23

    • 査読あり
  • [雑誌論文] A Reverse-Transcription Loop-Mediated Isothermal Amplification Technique to Detect Tomato Mottle Mosaic Virus, an Emerging Tobamovirus2023

    • 著者名/発表者名
      Kimura Kan、Miyazaki Akio、Suzuki Takumi、Yamamoto Toya、Kitazawa Yugo、Maejima Kensaku、Namba Shigetou、Yamaji Yasuyuki
    • 雑誌名

      Viruses

      巻: 15 ページ: 1688~1688

    • DOI

      10.3390/v15081688

    • 査読あり
  • [雑誌論文] First report of bacterial brown root rot in pea sprouts (Pisum sativum L.) caused by a Pseudomonas species2023

    • 著者名/発表者名
      Suzuki Takumi、Kitazawa Yugo、Motohashi Tomohiro Neil、Koinuma Hiroaki、Kimura Kan、Nishikawa Minaho、Maejima Kensaku、Ichikawa Kazunori、Namba Shigetou、Yamaji Yasuyuki
    • 雑誌名

      Journal of General Plant Pathology

      巻: 89 ページ: 347~351

    • DOI

      10.1007/s10327-023-01149-x

  • [雑誌論文] Target degradation specificity of phytoplasma effector phyllogen is regulated by the recruitment of host proteasome shuttle protein2023

    • 著者名/発表者名
      Suzuki Masato、Kitazawa Yugo、Iwabuchi Nozomu、Maejima Kensaku、Matsuyama Juri、Matsumoto Oki、Oshima Kenro、Namba Shigetou、Yamaji Yasuyuki
    • 雑誌名

      Molecular Plant Pathology

      巻: 25 ページ: e13410

    • DOI

      10.1111/mpp.13410

    • 査読あり
  • [学会発表] tomato mottle mosaic virus(ToMMV) に対するRT-LAMP 法の種子検査への 応用2024

    • 著者名/発表者名
      西川みなほ・木村 完・宮崎彰雄・ 鈴木拓海・山本桐也・北沢優悟・前島 健作・難波成任・山次康幸
    • 学会等名
      2024年度日本植物病理学会大会
  • [学会発表] ポテックスウイルス劣性抵抗性におけ るEXA1 と翻訳開始因子eIF4E ファ ミリーの機能的関係性2024

    • 著者名/発表者名
      西川雅展・勝 浩介・鯉沼宏章・ 橋本将典・煉谷裕太朗・松山樹立 ・ 前島健作 ・難波成任 ・山次康幸
    • 学会等名
      2024年度日本植物病理学会大会
  • [学会発表] ファイトプラズマ病のLAMP 診断に おける検体に応じた簡易DNA 抽出法 の最適化2024

    • 著者名/発表者名
      赤堀真子・宮崎彰雄・鯉沼宏章・徳 田遼佑・前島健作・難波成任・山次康 幸
    • 学会等名
      2024年度日本植物病理学会大会
  • [学会発表] ファイトプラズマのエフェクターの水 平伝播はトランスポゾン様配列PMU により引き起こされる2024

    • 著者名/発表者名
      岩渕 望・徳田遼佑・北沢優悟・ 鈴木拓海・宮﨑彰雄・前島健作・ 大島研郎・難波成任・山次康幸
    • 学会等名
      2024年度日本植物病理学会大会
  • [学会発表] PMU に座乗するファイロジェンの葉 化誘導能の比較2024

    • 著者名/発表者名
      徳田遼佑・前島健作・岩渕 望・ 北沢優悟・松本旺樹・鈴木誠人・ 大島研郎・難波成任 ・山次康幸
    • 学会等名
      2024年度日本植物病理学会大会
  • [学会発表] イネ黄萎病ファイトプラズマのファイ ロジェンに見出された特異な分解標的 スペクトラム2024

    • 著者名/発表者名
      北沢優悟・鈴木誠人・岩渕 望・ 前島健作・松山樹立・松本旺樹・ 大島研郎・難波成任・山次康幸
    • 学会等名
      2024年度日本植物病理学会大会
  • [学会発表] ファイロジェンの分解標的特異性はプ ロテアソーム関連因子との相互作用に よる制御を受ける2024

    • 著者名/発表者名
      鈴木誠人・北沢優悟・岩渕 望・ 前島健作・松山樹立・松本旺樹・ 大島研郎・難波成任・山次康幸
    • 学会等名
      2024年度日本植物病理学会大会
  • [学会発表] Dual resistance constructs conferring dominant / recessive and RNAi resistance targeting plant viruses in lilies2023

    • 著者名/発表者名
      Yasuyuki Yamaji, Yukari Okano, Oki Matsumoto, Nozomu Iwabuchi, Kensaku Maejima
    • 学会等名
      The 11th International Conference of Clinical Plant Science 2023
    • 国際学会
  • [学会発表] Genomic investigation on an unidentified historical potexvirus viola mottle virus: evidence for a synonymous relationship to tulip virus X2023

    • 著者名/発表者名
      Oki Matsumoto, Akio Miyazaki, Jun Tokoshima, Tetsuya Yoshida, Yukari Okano, Kensaku Maejima, Shigetou Namba, Yasuyuki Yamaji
    • 学会等名
      The 11th International Conference of Clinical Plant Science 2023
    • 国際学会
  • [学会発表] Mirabilis crinkle mosaic virus is the causal agent of pokeweed leaf crinkle mosaic disease2023

    • 著者名/発表者名
      Takumi Suzuki, Nozomu Iwabuchi, Ryosuke Tokuda, Oki Matsumoto, Tetsuya Yoshida, Masanobu Nishikawa, Kensaku Maejima, Shigetou Namba, Yasuyuki Yamaji
    • 学会等名
      The 11th International Conference of Clinical Plant Science 2023
    • 国際学会
  • [学会発表] Proposal of optimal DNA extraction protocol from various sample types directly applicable to LAMP-based on-site diagnosis of phytoplasma diseases2023

    • 著者名/発表者名
      Mako Akahori, Akio Miyazaki, Hiroaki Koinuma, Ryosuke Tokuda, Kensaku Maejima, Shigetou Namba, Yasuyuki Yamaji
    • 学会等名
      The 11th International Conference of Clinical Plant Science 2023
    • 国際学会

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公開日: 2024-12-25  

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