膵癌に対する免疫抑制機構克服を目指した2方向性テーラーメード免疫療法の開発

2021 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 21H04833
• 研究機関: 和歌山県立医科大学
• 研究代表者: 山上 裕機 和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (20191190)
• 研究分担者: 尾島 敏康 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (60448785) ; 勝田 将裕 和歌山県立医科大学, 医学部, 准教授 (50464673) ; 宮澤 基樹 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (90549734) ; 川井 学 和歌山県立医科大学, 医学部, 准教授 (40398459) ; 廣野 誠子 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (60468288) ; 岡田 健一 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (50407988)
• 研究期間 (年度): 2021-04-05 – 2025-03-31
• キーワード: がんワクチン / iPS細胞 / 樹状細胞 / ネオアンチゲン / ペプチド / 膵癌

研究実績の概要

膵癌cell line樹立とNeoantigen同定
42例の膵癌患者からの切除組織で解析した。切除した膵癌組織からCTOS法を用いた3次元培養を行った。ついで、膵癌細胞のCTOS cell line化を行った。つぎに初代培養から安定したCTOS cell lineを樹立した。42例中CTOS cell lineは3例に可能であった (Donor A, B, C)。cell lineが樹立できた3例の末梢血を採取し、単核球を凍結保存し、CTLのソースとした。続いて膵癌患者のCTOSの変異遺伝子をWhole-exome sequencing法で確認した。正常細胞として凍結保存している末梢血単核球を、膵癌細胞はCTOS cell lineを用いて行った。それらの細胞を自動核酸抽出装置 QIA symphony SP system (QIAGEN 社) にてシリカゲルによる精製と磁性粒子による操作でDNA抽出を行った。同時に患者血液から正常DNAの抽出を行った。核酸抽出後、ライブラリー構築・Whole-exome sequencing法によるシーケンスを行った。解析は外部委託 (Onvotherapy社) で行った。正常細胞および膵癌細胞のWES、膵癌細胞はRNAシーケンス解析を行い、膵癌細胞でのみ起きている遺伝子変異を同定するとともに、各遺伝子の膵癌細胞での発現量を解析中である。

現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

今年度は膵癌患者のCTOS cell line化とNeoantigen候補遺伝子の選定であったが，前半のライン化には成功しているが，Neoantigenの同定には至っていない。MSI-Hの膵癌患者はNeoantigenの同定が容易と考えるが，Donor A, B, CともMSI-Lであったのが一番の原因であろう。

今後の研究の推進方策

MSI-Hの膵癌患者より再度CTOS cell lineを作成し，Neoantigen解析を行う予定にしている。

研究成果

• [雑誌論文] Tumor RNA transfected DCs derived from iPS cells elicit cytotoxicity against cancer cells induced from colorectal cancer patients in vitro. (2022)
  • 著者名/発表者名: Maruoka S, Ojima T, Iwamoto H, Kitadani J, Tabata H, Tominaga S, Katsuda M, Hayata K, Takeuchi A, Yamaue H.
  • 雑誌名: Sci Rep. 巻: 12 ページ: 3295
  • DOI: 10.1038/s41598-022-07305-1.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Kras Gene Analysis Using Liquid-Based Cytology Specimens Predicts Therapeutic Responses and Prognosis in Patients with Pancreatic Cancer. (2022)
  • 著者名/発表者名: Itonaga M, Ashida R, Murata SI, Yamashita Y, Hatamaru K, Tamura T, Kawaji Y, Kayama Y, Emori T, Kawai M, Yamaue H
  • 雑誌名: Cancers (Basel). 巻: 14 ページ: 551
  • DOI: 10.3390/cancers14030551.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Randomized phase III trial of intravenous and intraperitoneal paclitaxel with S-1 versus gemcitabine plus nab-paclitaxel for pancreatic ductal adenocarcinoma with peritoneal metastasis (SP study). (2022)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto T, Fujii T, Hirano S, Motoi F, Honda G, Uemura K, Kitayama J, Unno M, Kodera Y, Yamaue H
  • 雑誌名: Trials. 巻: 23 ページ: 119
  • DOI: 10.1186/s13063-022-06049-7.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Pancreatectomy With Artery En-bloc Resection for Pancreatic Neck/Body Cancer: A Single-arm Pilot Study. (2022)
  • 著者名/発表者名: Okada KI, Kawai M, Hirono S, Hayami S, Miyazawa M, Kitahata Y, Ueno M, Kobayashi R, Miyamoto A, Wada Y, Asamura S, Yamaue H.
  • 雑誌名: Anticancer Res. 巻: 42 ページ: 217-227
  • DOI: 10.21873/anticanres.15476.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Comprehensive Genomic Profiling of Neuroendocrine Carcinomas of the Gastrointestinal System. (2022)
  • 著者名/発表者名: Yachida S, Totoki Y, Nakatani Y, Horie M, Kawasaki K, Nakamura H, Saito-Adachi M, Suzuki M, Takai E, Hama N, Higuchi R, Hirono S, Shiba S, Kato M, Furukawa E, Arai Y, Rokutan H, Hashimoto T, Mitsunaga S, Kanda M, Tanaka H, Takata S, Shimomura A, Oshima M, Hackeng WM, Okumura T, Okano K, Yamamoto M, Yamaue H
  • 雑誌名: Cancer Discov. 巻: 12 ページ: 692-711
  • DOI: 10.1158/2159-8290.CD-21-0669.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Circulating Tumor DNA as a Potential Prognostic Marker in Patients with Borderline-Resectable Pancreatic Cancer Undergoing Neoadjuvant Chemotherapy Followed by Pancreatectomy. (2022)
  • 著者名/発表者名: Kitahata Y, Kawai M, Hirono S, Okada KI, Miyazawa M, Motobayashi H, Ueno M, Hayami S, Miyamoto A, Yamaue H.
  • 雑誌名: Ann Surg Oncol. 巻: 29 ページ: 1596-1605
  • DOI: 10.1245/s10434-021-10985-0.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Aberrant integration of Hepatitis B virus DNA promotes major restructuring of human hepatocellular carcinoma genome architecture. (2021)
  • 著者名/発表者名: Ueno M, Hayami S, Yamaue H, et al,
  • 雑誌名: Nat Commun. 巻: 12 ページ: 6910
  • DOI: 10.1038/s41467-021-26805-8.
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Complete circumferential lymphadenectomy around the superior mesenteric artery with preservation of nerve plexus reduces locoregional recurrence after pancreatoduodenectomy for resectable pancreatic ductal adenocarcinoma. (2021)
  • 著者名/発表者名: Hirono S, Kawai M, Okada KI, Miyazawa M, Kitahata Y, Kobayashi R, Hayami S, Ueno M, Yamaue H.
  • 雑誌名: Eur J Surg Oncol. 巻: 47 ページ: 2586-2594
  • DOI: 10.1016/j.ejso.2021.06.005.
  • 査読あり