抗体軽鎖配列の組み合わせと抗原への交差反応性の関係

2023 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 21K05300
• 研究機関: 藤田医科大学
• 研究代表者: 大島 信子 藤田医科大学, 国際再生医療センター, 講師 (60387694)
• 研究期間 (年度): 2021-04-01 – 2025-03-31
• キーワード: ファージディスプレイ / 交差反応性 / 抗体軽鎖

研究実績の概要

ファージディスプレイ技術により作製したファージ抗体ライブラリーでは、1種類の重鎖配列に対し様々な種類の軽鎖配列との組み合わせを持たせることが可能である。本研究者は、ファージディスプレイ技術をもとに作製したファージ抗体ライブラリーから抗インフルエンザウイルス抗体群を取得している。当該研究では、その中から1種類の抗体重鎖配列に対し複数の軽鎖配列の組み合わせを持つ抗体群を抽出し、軽鎖配列の違いによるインフルエンザウイルス株への交差反応性に及ぼす影響を検討する。それにより、抗原認識における軽鎖配列の役割を明らかにすることが目的である。
当該年度では、昨年度までに終了した抗体クローン群の軽鎖配列解析からの分類を引き続き実施した。各重鎖配列に対する軽鎖の組み合わせを、①λ鎖のみ、②κ鎖のみ、③λ鎖、κ鎖両方を指標に分類した。さらに、複数の軽鎖配列との組み合わせ(①変異関係にある配列、②Germline geneの異なる配列)を持つ重鎖配列を抽出した。
その中から、昨年度に引き続き複数のインフルエンザウイルス変異株に反応性を示すクローンを選出した。核タンパクに対する抗体群を除き、ヘマグルチニンに対する反応性を有するクローンを中心に選抜したところ、H3N2型の変異株に比較的幅広い交差反応性を持つ大きな抗体群が得らえた。この抗体群は、２種類のインフルエンザワクチン株を抗原にファージ抗体ライブラリーからのスクリーニングで得られた抗体群で、非常に類似した重鎖配列を持つにも関わらず、複数の変異ウイルス株に対する交差反応性は大きく２種類であった。これらのことから、1種類の重鎖配列に対しλ鎖、κ鎖両方の組み合わせを持ち、その組み合わせにより複数のウイルス株HAに対する反応性が変化している可能性が示唆される。

現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

本年度は、使用していた居室および研究室の急な引っ越し作業を行うことになり、3か月ほど実験ができない期間が生じた。そのため、研究スケジュールの変更を行わざるを得ず、当初予定していた通りに実験が進行せず、予定よりもやや遅れている。

今後の研究の推進方策

当初の予定よりもやや遅れているものの、研究自体は当初の予定通り進行している。本年度得られた抗体群で、抗体軽鎖によるウイルス株HAへの反応性の変化を検討を中心に行い、さらに、競合実験等によるエピトープ絞り込みまで視野に入れてまとめたいと考えている。

次年度使用額が生じた理由

当該年度においては、当初の予定外の引っ越しが3か月ほど続いたことにより、予定していた実験が実施できておらず、その準備もできなかったことから、当初予定していた予算の執行ができなかった。
次年度では、当該年度実施できなかった実験を引き続き行う予定であり、そのために必要な試薬等を購入予定である。
また、本研究を遂行するために本年度よりテクニシャンを一人パートタイマーで雇用しており、次年度もその雇用は継続する予定である。