| 研究実績の概要 |
我々は、植物の主要な光受容体であるフィトクロムが、シロイヌナズナにおいて、転写開始点を変化させることで、およそ400種類のタンパク質の細胞内局在が光依存的に変化することを発見した (Ushijima et al., Cell, 2017)。そしてそれらの細胞質局在型アイソフォームの中に光環境への植物の適応に働く遺伝子があることを明らかにした。また当該制御がシロイヌナズナのみでなく、イネやトマトにも存在したことから、当該制御機構が生物に普遍的に存在することを示した。
本研究は、イネにおいて、光依存的な転写開始点制御によって生じる細胞質局在型アイソフォームの過剰発現体や欠損変異体を作成し、細胞質局在型アイソフォームの機能を明らかにすることで、当該遺伝子の育種素材としての評価を行うことを目的として行った。
まずイネにおいて改めて光依存的な転写開始点の変化を解析し、当該制御により光依存的に細胞質局在型アイソフォームを生じる遺伝子調べた。さらにその中から詳細な解析を行う遺伝子をピックアップした。次にイネで過剰発現体を作製するために必要なベクターを構築した。作製したベクターはNEBuilderやIn-Fusionでのコンストラクションに利用しやすいように制限酵素サイトを導入した。作製したベクターにターゲット遺伝子を導入したコンストラクトの作製を行い、日本晴由来のカルスにアグロバクテリウムを介して形質転換を行った。
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