| 研究課題/領域番号 |
21K05574
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| 研究機関 | 京都大学 |
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研究代表者 |
大野 翔 京都大学, 農学研究科, 助教 (10722001)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| キーワード | アントシアニン / トウガラシ / DNAメチル化 / レトロトランスポゾン / 着色変動 / エピジェネティクス |
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| 研究実績の概要 |
UP系統はアントシアニンを蓄積するトウガラシ ‘Peruvian Purple’から枝変わりによって生じた着色変動性を示す系統で、同一個体内において紫花・白花・紫と白の複色花を同時に着生し，その着色変動性にはエピジェネティックなメカニズムの関与が示唆されている．本研究は，UP系統の着色変動を引き起こす遺伝子の特定と着色を制御するエピジェネティックなメカニズムの解明を行うことを目的としている．
昨年度に行った『着色変動遺伝子』のマッピング解析から、『着色変動遺伝子』はCaMYBA含む約1Mbの領域に座乗していることが示唆された。この領域に座乗している4遺伝子の発現解析から、『着色変動遺伝子』はCaMYBAである可能性が高いと考えられた。また、McrBC-PCRによりCaMYBAに挿入しているLINE-1の5’末端近傍領域において白花でのみ強くDNAメチル化を生じているという結果が得られ、着色変動性にDNAメチル化が関与している可能性が示唆された。
本年度はバイサルファイトシーケンスによりCaMYBAに挿入しているLINE-1の5’ 末端近傍領域および3’ 末端近傍領域のDNAメチル化を調査した。その結果、LINE-1の5’ 末端近傍領域において‘Peruvian Purple’ではDNAメチル化率が低下していることが示唆された。UPの紫花でも一部の領域でDNAメチル化率が低下していることが示唆されたが、その一方でUPの白花ではその領域のDNAメチル化率は高く維持されていた。LINE-1の3’ 末端近傍領域においては着色とDNAメチル化に相関は見られなかった。したがって、CaMYBAに挿入しているLINE-1の5’領域のDNAメチル化が着色変動性に関与していると考えられた。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
『着色変動遺伝子』のマッピング解析とMcrBC-PCRおよびバイサルファイトシーケンス解析から、『着色変動遺伝子』がCaMYBAであり、かつCaMYBAに挿入しているLINE-1の5’末端近傍領域のDNAのメチル化が着色変動に重要であることが示唆された。よって、順調に進展していると考えられる。
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| 今後の研究の推進方策 |
『着色変動遺伝子』のファインマッピング解析に関しては現在も進行中であり、新たにマーカーを追加して、さらに候補領域を狭めることに取り組んでいる。これまでの実験からMcrBC-PCR解析でDNAメチル化に差が見られた領域を着色変動性のマーカーとして用いることが可能であることが示唆されたので、McrBC-PCRを用いて着色変動を発達段階別に経時的に調査する予定である。また、2021年度に購入したインキュベーターを用いて、引き続き栽培環境が着色変動に及ぼす影響に関しても調査を行う。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
着色変動と相関があるDNAのメチル化が検出できたため、このDNAメチル化をマーカーとして栽培環境条件の影響を調査する予定である。また、DNAメチル化に関わる遺伝子に関しても解析を行うことを予定している。
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