研究実績の概要 |
DNAトポイソメラーゼ (トポ )IIβはDNAの高次構造を変換する酵素で,私たちはトポIIβが一群の神経特異的遺伝子の発現を誘導,または抑制することを明らか にした.本研究では,トポIIβとゲノム上で共局在する因子であるhnRNP-U, CTCFに着目し, トポIIβによる神経特異的遺伝子の発現制御機構を明らか にすることを目的とする.トポIIβ,hnRNP-U,CTCFは,いずれもDNAにもRNAにも結合する活性がある. hnRNP-Uは,試験管内で,AT-richなS/MAR DNAに選択的に結合し,その結合にはN末に存在するSAPドメインが重要と考えられてきた.我々はhnRNP-U欠失変異体を用いてS/MAR DNA 結合活性を解析してC末に存在するRGドメインがS/MAR DNA 結合活性に重要であること,RGドメイン自体にS/MAR DNA結合活性があることを明らかにした.また,AT-rich DNAのminor grooveを認識するNetropsinが RGドメインのS/MAR DNA結合を選択的に阻害することから,RGドメインがAT-rich DNAのminor grooveを認識していることを明らかにした.RGドメインはRNA結合領域を含むことから,hnRNP-UのS/MAR DNA結合活性に対するRNAの効果を検証し,RNAが量依存的にhnRNP-UのS/MAR DNA結合活性を阻害することを明らかにした.細胞核内では,DNA,RNAが液―液相分離により機能的に分画されていることが予想されている.hnRNP-UのDNA/RNA結合活性がその制御に関わる可能性が示唆された(論文値投稿中).
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