2023 年度研究成果報告書

体細胞モザイク変異疾患モデルマウスとLOH検出マウスの開発

研究課題

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研究課題/領域番号	21K06131
研究種目	基盤研究(C)
配分区分	基金
応募区分	一般
審査区分	小区分43050:ゲノム生物学関連
研究機関	公益財団法人かずさDNA研究所
研究代表者	中山学公益財団法人かずさDNA研究所, 先端研究開発部, 主任研究員 (30370927)
研究期間 (年度)	2021-04-01 – 2024-03-31
キーワード	ゲノムエンジニアリング / ゲノム改変技術 / 部位特異的組み換え酵素 / VCre/VloxP / SCre/SloxP / バイオテクノロジー
研究成果の概要	皮膚病では体細胞突然変異が原因となり生じるモザイク変異疾患が数多く見られる。これらの疾患モデルマウスを作製し発症機構を調べるためには、表皮細胞の(全部ではなく)一部だけに遺伝子ノックアウトまたは変異を導入し、かつその細胞を蛍光標識して解析する必要がある。本研究ではCreとCRISPR/Cas9の系を組み合わせることによって、頻度は稀であるが、一個の細胞内では確実にCre反応が起きるeditedCre(edCre)システムを開発した。この新規手法が正しく機能することは、レポーター細胞を用いた蛍光顕微鏡による解析だけでなく、次世代シーケンサーによる解析により示すことができた。
自由記述の分野	機能ゲノム学
研究成果の学術的意義や社会的意義	先天性角化症・魚鱗癬にはgain-of-functionである優性の体細胞突然変異が原因となり生じるモザイク疾患が多数存在し、それらのモザイク疾患を調べるためには、表皮細胞の一部だけ変異を導入かつ蛍光標識して解析する必要がある。また、皮膚細胞だけでなく、他の組織においても低頻度で細胞を標識するニーズは確実に存在している。本新規技術を他の組織の低頻度な細胞標識に用いることは比較的容易に達成できると考えられるので、多くの研究者が利用できるコアな技術となることが期待される。