| 研究課題/領域番号 |
21K06189
|
|---|
| 研究機関 | 奈良先端科学技術大学院大学 |
|---|
研究代表者 |
秋山 隆太郎 奈良先端科学技術大学院大学, 先端科学技術研究科, 助教 (00790403)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
|
| キーワード | 感覚器 / 感覚神経 |
|---|
| 研究実績の概要 |
動物は感覚器を通じて環境からの刺激を受容し、適切に行動する。ヒトでは傷害された感覚細胞は殆ど再生しないが、ゼブラフィッシュの感覚細胞は再生される。このとき、再生された感覚細胞は正しい神経投射を受け機能的な再生を遂げる。感覚細胞は神経と接続して初めて機能するので、感覚細胞の再生過程は神経と協調していると考えられる。しかし、これまで解析された感覚細胞の再生メカニズムでは感覚細胞の分化に焦点があてられており、感覚細胞再生と神経投射との相互作用については十分に解明されていない。本研究ではゼブラフィッシュ側線感覚器をモデルとし、感覚細胞と神経とのコミュニケーションに注目する。イメージング技術を駆使して、ゼブラフィッシュ側線感覚器の再生過程における感覚有毛細胞と神経との協調を解析することで、側線感覚器が機能的な再生を果たすメカニズムの解明を目指す。
本研究では感覚有毛細胞と側線神経との協調を仲介する因子として、側線感覚器の支持細胞が分泌する線維芽細胞増殖因子に着目している。この因子はパラクラインに働き有毛細胞の分化を負に制御することが知られているが、本研究では特に有毛細胞再生時の神経投射における役割について解析する。
昨年度までに側線線感覚器で発現する２つの線維芽細胞増殖因子についてCRISPR/CAS9システムを用いてノックアウトゼブラフィッシュ系統を樹立していた。今年度はこれらを掛け合わせてダブルヘテロ個体を作出し、さらに側線神経と有毛細胞を標識するトランスジェニック系統との交配を行い、ダブルヘテロ個体同士を交配してダブルノックアウト個体を得た。現在ダブルノックアウト個体での有毛細胞再生時の神経投射について解析を進めている。また予想外の結果として、当初注目していた有毛細胞群と神経線維との接続部とは異なる領域において、ダブルノックアウト個体で側線神経軸索が形成不全となる表現型を見出した。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
計画していた系統が得られ解析を進めている事、および関連する予想外の観察結果も得られたことから、おおむね順調に進展していると判断した。
|
| 今後の研究の推進方策 |
候補因子のダブルノックアウト個体で有毛細胞再生時の神経投射ついて解析する。
|
| 次年度使用額が生じた理由 |
目的の系統を得る為の実験・作業が予定よりも小規模で済んだことで未使用額が生じた。一方で、解析対象の系統数は予定よりも増えており、さらに当初想定していなかった部位の関連表現型についても解析する必要がでてきたため、次年度の解析に係る試薬購入や動物維持に使用する。
|
