| 研究課題/領域番号 |
21K06390
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| 研究機関 | 新潟大学 |
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研究代表者 |
本多 敦子 新潟大学, 医学部, 助教 (40467072)
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| 研究分担者 |
野住 素広 新潟大学, 医歯学系, 講師 (00420323)
伊藤 泰行 新潟大学, 医歯学系, 助教 (70710573)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| キーワード | 神経成長 / 極長鎖脂肪酸 / 脂質ラフト / 神経成長円錐 / 神経極性 / 神経軸索 / セラミド / lipid order |
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| 研究実績の概要 |
神経成長円錐の脂質ラフト形成や軸索成長における極長鎖脂肪酸産生の生理的役割を解明するため、成長円錐に豊富な極長鎖脂肪酸産生酵素 GPSN2に着目してGPSN2ノックアウト(KO)マウスを作製、GPSN2ホモ欠損（KO）マウスがE9.5の胎生致死であることを確認した。E9.5のGPSN2KOマウスのホールマウントでの免疫染色をおこなったところ、中枢・末梢における神経回路形成の異常が認められ、GPSN2ヘテロ欠損（Ht）マウスE14.5海馬神経細胞またはshRNAノックダウンE14.5海馬神経細胞の成長円錐のイメージング解析においても、神経成長円錐の形態異常と極性形成阻害による神経軸索成長の異常を確認し、神経成長におけるGPSN2の発現の重要性を明らかにした。
神経回路形成異常が認められたE9.5マウスにおける鎖長別脂質代謝の変化についてノンターゲットのリピドミクス解析をおこなったところ、GPSN2 KOマウスにおいて、セラミド合成経路における産生低下、特に極長鎖脂肪酸を含有する産物の顕著な産生阻害が認められた。またGPSN2 Htならびに野生型マウスのE14.5胎仔脳の成長円錐膜画分のリピドミクス解析においても、Htマウスにおいて脂質ラフト構成脂質の著しい減少が認められた。各成長円錐膜画分のウエスタンブロッティング解析により、Htマウスにおける脂質ラフト局在タンパク質（DRMタンパク質）分布量の著しい低下も認めた。
海馬神経細胞の成長円錐形質膜における相状態や脂質ラフト分布について、蛍光プローブを用いたイメージング解析により、Htマウスにおける成長円錐の脂質膜の相状態の顕著な変化と、脂質ラフトの分布の著しい減少を明らかにし、GPSN2が成長円錐の脂質ラフト形成に必要であることを明らかにした。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
1: 当初の計画以上に進展している
理由
計画していたイメージングによる解析とオミクスによる解析を遂行して、これまで神経系以外においても明らかにされていなかった脂質ラフト形成における脂質合成の作用を示す知見が得られ、（今後はそのメカニズムの解明が課題ではあるが）本研究目的である神経成長におけるその作用の重要性を明らかにし、その成果を学会発表と論文投稿までまとめることができた。
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| 今後の研究の推進方策 |
今後は、極長鎖脂肪酸合成によるセラミド合成がどのように脂質ラフト形成を制御するのか、そのメカニズムを成長円錐におけるメタボロミクス解析や蛍光プローブによるイメージング解析により明らかにする。
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