| 研究課題/領域番号 |
21K06409
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
岡 雄一郎 大阪大学, 大学院連合小児発達学研究科, 講師 (30614432)
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| 研究分担者 |
佐藤 真 大阪大学, 大学院連合小児発達学研究科, 教授 (10222019)
滋野 修一 大阪大学, 大学院医学系研究科, 助教 (90360560) [辞退]
谷口 学 大阪大学, 大学院医学系研究科, 技術専門員 (30397707)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| キーワード | 領野間回路 / 回路形成 / 大脳皮質 |
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| 研究実績の概要 |
随意運動の調節や感覚と運動の連合学習には、運動野を起点とした皮質―基底核－視床－皮質（CBTC）ループと感覚野を起点とした皮質－視床高次核－皮質（CTC）ループが重要な役割を果たしているが、これらのループがどのように連関して統合的な感覚運動調節を行っているかはよくわかっていない。本研究では、一次体性感覚野S1から一次運動野M1に投射する回路が２つのループをつなぐ機能回路であると仮定して、その接続様式を、起点となるS1での層分布と対応付けて解明することを目的とした。手法としては2/3層と5a層の回路はPlxnd1-tTAマウスを、6b層の回路はCtgf-CreERT2マウスを用いて、各種AAVベクターをS1やM1に注入することで各回路を特異的に標識して解析する。
期間の前半では、経シナプストレーサー分子を発現するAAVベクターを用いてS1からの出力先細胞の可視化を行い、投射領域によっては後シナプス細胞を検出することに成功したが、M1での検出効率が低く、その同定には至らなかった。
そこで、シナプス前終末とシナプス後膜に発現させたSplit-GFPの再構成により回路接続を可視化するmGRASP法を用いてS1からM1への接続の可視化を行った。これによりシナプス結合の検出は可能となった。現在は、シナプス後細胞についてその投射先による分類ができるように、逆行性に感染するAAV2-retroを用いた実験を進めている。
M1におけるシナプス構造の電子顕微鏡解析については、dAPEX２を用いた可視化の実験を進めているが、幼若マウスの電子顕微鏡観察はサンプル調製条件の設定が難しく、イタリア・トリノ大学のグループとの共同研究で最適化を行っている。
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