| 研究課題/領域番号 |
21K06694
|
|---|
| 研究機関 | 東京薬科大学 |
|---|
研究代表者 |
樋口 慧 東京薬科大学, 薬学部, 助教 (10625304)
|
|---|
| 研究分担者 |
井上 勝央 東京薬科大学, 薬学部, 教授 (50315892)
岸本 久直 東京薬科大学, 薬学部, 助教 (80723600)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
|
| キーワード | オリゴペプチドトランスポーター / 促進拡散 / 小腸上皮細胞 |
|---|
| 研究実績の概要 |
今年度は、申請者が見出した新規オリゴペプチドトランスポーター(EOPT1)およびアイソフォームと既知のプロトン共役型オリゴペプチドトランスポーター(PEPTs)の共発現系を用いたオリゴペプチド構造類似体glycylsarcosine排出能の定量的評価を実施した。当初PEPT安定発現細胞株の樹立を試みたが、目的の実験を実施可能な発現レベルの細胞株は得られなかった。そこで、EOPT1発現細胞とPEPTを一過性共発現させた細胞での評価を実施した。PEPTを介したglycylsarcosine取り込みが抑制されること、および細胞内からglycylsarcosine排出の促進が確認された。さらにEOPT1による直接的なglycylsarcosine取り込みを評価できる実験系の確立に成功した。その系を用いて、glycylsarcosine以外のオリゴペプチド輸送能を評価した。その結果、EOPT1がPEPT基質と類似したオリゴペプチドの認識能を有することが示された。今後その基質認識性について、PEPTや他の栄養物トランスポーターとの差異についての比較検討を行う予定である。また同様の実験系を用いて、EOPT1のアイソフォームのオリゴペプチド輸送能を評価したところ、一部のアイソフォームで弱いながらも、オリゴペプチド輸送能を有する可能性が示された。これらの成果は、本研究課題の目的である「小腸上皮細胞の側底膜でオリペプチド輸送を担うトランスポ―ター分子同定」を実施する上で、その有力な候補であるEOPT1およびアイソフォームの輸送特性を示す重要な成果である。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
今年度は、EOPT1とアイソフォームのオリゴペプチド輸送能の評価がほぼ予定通り完了した。現在同様の実験系を用いて、オーファントランスポーター群の輸送能評価も進めている。
|
| 今後の研究の推進方策 |
今後は、計画通りEOPT1およびアイソフォームの発現プロファイルの評価を行う予定である。既に予備検討は開始しており、それらの発現プロファイルが解明できれば、本研究計画の目的である「小腸上皮細胞の側底膜でオリゴペプチド輸送を担うトランスポ―ター分子同定」につながることが期待される。
|
