| 研究課題/領域番号 |
21K06758
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| 研究機関 | 奈良県立医科大学 |
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研究代表者 |
和中 明生 奈良県立医科大学, 医学部, 教授 (90210989)
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| 研究分担者 |
石西 綾美 奈良県立医科大学, 医学部, 助教 (10836018)
辰巳 晃子 奈良県立医科大学, 医学部, 准教授 (90208033)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| キーワード | マクロファージ / SNX25 / 骨髄移植 / vonFrey テスト / 神経因性疼痛 / コンディショナルKO / 真皮 |
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| 研究実績の概要 |
本年度はCx3cr1-CreERT;SNX25-floxed マウスでTamoxifenを食餌中に混入させることで組み替えを誘導し、モノサイトーマクロファージ系細胞でSNX25をConditional KOしたマウスで vonFreyテストを行い、Tamoxifenを投与していないコントロールマウス、或いはSNX25-floxedマウスにおいて同様のvonFrey
テストを行い、機械的刺激に対する感受性を比較検討した。Conditional KOマウスにおいて特異的にvonFreyテストにおける刺激逃避閾値が上昇していることが判明し、SNX25が疼痛関連因子であることを確認した。さらにこのConditional KOマウスでは中枢神経内のミクログリアも同時にKOされているので、このことを回避するために、Cx3cr1-CreERT;SNX25-floxedマウスから骨髄細胞を抽出、ブスルファンを用いてあらかじめ骨髄抑制しておいたSNX25-floxedマウスの骨髄に細胞を移植した。血液中の骨髄細胞の置換をFacsで確認した後にTamoxifenを経口投与したところ、上記のConditional KOとほぼ同じく機械的刺激に対する感受性が鈍化していた。骨髄移植実験自体のコントロールとして野生型マウスの骨髄を野生型マウスに移植しても感受性の鈍化は認められなかった。この事実は移植した骨髄細胞が末梢真皮にマクロファージとして生着し、SNX25を介した機械的刺激に対する感受性を調節していることをしさしている。
さらに上記Conditional KOマウスにおいて神経因性疼痛を惹起させた。コントロールであるSNX25-floxedマウスでは1週間にわたり機械的刺激に対する過敏行動が認められたが、Conditional KOマウスではこのような有意な疼痛過敏は認められなかった。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
当初目的としていた骨髄移植による実験が成功し、脊髄ミクログリアの効果を切り離すことが出来た。また神経因性疼痛においてもSNX25が貢献していることを証明できたので全体的に実験は順調に進んでいると判断している。
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| 今後の研究の推進方策 |
SNX25がマクロファージ内で機能して、末梢感覚神経に何らかの働きかけをしていることはほぼ間違いが無いと考えられる。今後SNX25の細胞内情報伝達と末梢神経感覚との関係を詰めていきたい。
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