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制御性T細胞(Treg)は転写因子Foxp3のはたらきにより免疫反応を抑制する活性をもつ.しかしTregが生体内でどのようなタイミングで抑制活性を発揮するのか、 その動的な分子メカニズムは何かについては概ね不明である.このため申請者は，蛍光Timerタンパクをレポーター遺伝子として用いて生体内での転写の時間動態 を1細胞レベルで解析する技術Tockyを開発し，生体内で免疫反応中のT細胞におけるFoxp3転写動態の研究を進めてきた. 本研究では，Foxp3の遺伝子制御領域によるFoxp3転写時間動態の制御メカニズムの解明を目指す.特に，Tregが抗原を認識すると，Treg内のFoxp3タンパクが Foxp3遺伝子制御領域に結合して転写を活性化(=自己転写制御ループを作動)させてTregの抑制活性を誘導するという仮説をTockyおよび分子生物学的実験により 検討，新規メカニズム解明を目指している。この目的の下、Foxp3-TockyマウスのCNS2配列をCRISPR編集により欠損させたマウス(Foxp3-TockyDCNS2)を使用し て，抗原によるT細胞免疫誘導モデル(接触性皮膚炎およびペプチド免疫)を解析し，生体内で免疫反応中にTregがどのようにして抑制活性を発揮する転写プログ ラムを成立させるかを解析している。特に，Tregが抗原刺激や炎症により活性化してエフェクターTregとなる際のFoxp3転写時間動態に焦点を当て，CNS2配列欠 損がFoxp3転写時間動態・エフェクターTregの表現型・機能に与える影響を、定常状態ならびに分化中のFoxp3動態ならびに抗原刺激モデルを使った抗原に反応性のFoxp3の制御を解析した。
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