補体因子ＭＡＳＰ－３を活性化する血中プロテアーゼの同定

2023 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 21K07083
• 研究機関: 福島県立医科大学
• 研究代表者: 町田 豪 福島県立医科大学, 医学部, 講師 (80583632)
• 研究分担者: 関根 英治 福島県立医科大学, 医学部, 教授 (40363759)
• 研究期間 (年度): 2021-04-01 – 2024-03-31
• キーワード: MASP-3 / 補体 / 第二経路 / D因子

研究実績の概要

PAタグ融合リコンビナントマウスMASP-3(rmMASP-3-PA)を用いたクロスリンク共免疫沈降法で、MASP-3を活性化する酵素として複数の候補が単離され、これまでそのうちの1つの分子についてその非関与を証明した。本年度は、同定されたMASP-3を活性化する酵素の候補のうち、その他の複数の候補について、MASP-3の活性化に関与するかどうかを検討した。その結果、いずれの分子においても、MASP-3の活性化ならびに補体活性化経路にほとんど関与しないことが強く示唆された。以上の結果から、単離手技において、MASP-3分子または免疫沈降法に必要な抗体、担体などの分子に対する非特異的な結合などの影響が非常に大きいことが示唆されたため、MASP-3を担体としない方法を採用する必要性があると考えられた。そこで、血清を各種クロマトグラフィーにより複数の画分に分けて、リコンビナントMASP-3を活性化する成分を含む画分を複数の分離ステップを経て同定する方法を開発した。1段階目の分離によって得られた複数の血清画分を用いて検討した結果、MASP-3の活性化能を有する画分が存在することを見出しており、現在さらにその詳細な解析を進めている。本研究において、本研究戦略が有効である可能性を強く示すことができたため、現在さらなる血清成分の分画化を進行しており、MASP-3を活性化する血中プロテアーゼを同定していく。

研究成果

• [雑誌論文] C5a stimulation induces caspase-1 activation and mature IL-1β production in human peripheral blood mononuclear cells (2024)
  • 著者名/発表者名: Yuya Fujita, Haruki Matsumoto, Kenji Inada, Michio Onizawa, Kenji Saito, Yuya Sumichika, Shuhei Yoshida, Jumpei Temmoku, Naoki Matsuoka, Tomoyuki Asano, Shuzo Sato, Takeshi Machida, and Kiyoshi Migita
  • 雑誌名: Immunol Med 巻: In press ページ: 1-8
  • DOI: 10.1080/25785826.2023.2292665
  • 査読あり
• [雑誌論文] Complement activation products in tears of dry eye and meibomian gland dysfunction. (2024)
  • 著者名/発表者名: Hiroki Maehara, Koki Norikawa, Keiichiro Tanaka, Yutaka Kato, Akihito Kasai, Ryo Mukai, Tomoko Omori, Takeshi Machida, Hideharu Sekine, and Tetsuju Sekiryu
  • 雑誌名: Sci Rep 巻: 14 ページ: 43
  • DOI: 10.1038/s41598-023-46634-7
  • 査読あり
• [雑誌論文] Tear fluid and complement activation products in tears after ocular surgery (2023)
  • 著者名/発表者名: Hiroki Maehara, Koki Norikawa, Keiichiro Tanaka, Yutaka Kato, Akihito Kasai, Tomoko Omori, Takeshi Machida, Hideharu Sekine, and Tetsuju Sekiryu
  • 雑誌名: BMC Ophthalmol 巻: 23 ページ: 329
  • DOI: 10.1186/s12886-023-03037-6.
  • 査読あり
• [雑誌論文] 重症筋無力症の病態：補体の役割と活性化のメカニズム (2023)
  • 著者名/発表者名: 町田豪、関根英治
  • 雑誌名: 脳神経内科 巻: 98 ページ: 809-815
• [学会発表] Lack of MASP-1 results in delayed onset of renal dysfunction and prolonged survival in lupus-prone MRL/lpr mice (2024)
  • 著者名/発表者名: Takeshi Machida, Hiroto Monoe, Yumi Ishida, Teizo Fujita, and Hideharu Sekine
  • 学会等名: 第52回日本免疫学会学術集会
• [学会発表] 補体レクチン経路の活性化機構と炎症性疾患への関与 (2023)
  • 著者名/発表者名: 町田豪
  • 学会等名: 日本比較免疫学会第 34 回学術集会
  • 招待講演
• [学会発表] Lack of MASP-1 results in delayed onset of albuminuria and prolonged survival in lupus-prone MRL/lpr mice (2023)
  • 著者名/発表者名: Takeshi Machida, Hiroto Monoe, Yumi Ishida, Teizo Fujita, and Hideharu Sekine
  • 学会等名: The 29th International Complement Workshop
  • 国際学会
• [学会発表] MASP-1欠損MRL/lprマウスではループス様腎炎による腎機能障害の発症が遅延し、生存期間が延長する (2023)
  • 著者名/発表者名: 物江洋人、町田豪、石田由美、藤田禎三、関根英治
  • 学会等名: 第59回日本補体学会学術集会